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核酸的银染方法

2019.5.20

核酸硝酸银染色:参考《锌对缺血再灌注大鼠肝脏金属硫蛋白一1基因表达的影响》营养学报2000年第22卷第4期294-297

取PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳,所得凝胶进行硝酸银染色.
程序如下:(1)于10%乙醇+0.5% 冰醋酸溶液中固定6 min;(2)于10%乙醇+0.5% 冰醋酸溶液中再固定6 min;(3)于0.2 %AgNO3溶液中浸泡10~12 min;(4)用去离子水充分漂洗3~5次;(5)于1.5 %NaOH + 0.4 %甲醛溶液中适度显色;加入0.75% Na2CO3终止染色 

 

参考《 核酸电泳银染技术及干胶制备的改良》临床与实验病理学杂志1999 Vol.15 No.5 P.401
核酸电泳银染色技术,是近年发展起来的一种敏感性高、操作简便、无毒污染、快速省时的新方法。
银染色 
(1)固定:先用10%乙醇固定5 min;然后用1%硝酸固定10~15 min(去离子水洗 2次)。
(2)染色:0.2%硝酸银染色5 min(去离子水洗2次)。
(3)显色:3%无水Na2CO3显色(18 gNa2CO3+600 ml水+60 μl甲醛+60 μl Na2SO4),显色过程中更换显色液2~3次,直至DNA Marker或阳性模板条带清晰为止(去离子水洗2次)。
(4)中止显色:弃显色液,水洗,加固定液(1∶3的1%硝酸+10%乙醇)。 


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