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流式细胞仪使用方法(二)

2019.10.01

通过预设的获取模式文件进行样品分析
 

  1.从苹果标志中选择CELLQUEST,新视窗出现后从File指令栏中选择Open,打开预设的获取模式文件。

  2.从屏幕上方Acquire指令栏中,选取Connect to Cytometer进行电脑和仪器的连机。将出现的Acquisiton 

  Control对话框移至合适位置。

  3.从Cytometer指令栏中选取Instrument Settings,在其对话框中选择Open以调出以前存储的相同实验的仪器设定,按Set 确定。

  4.在Acquire指令栏中,选择Acquisition&Storage决定储存的细胞数,参数,信号道数。其中Resolution在做细胞表面标志时选择256,做DNA时选择1024。Parameter 

  Saved…则根据不同的检测对象选择不同的参数。

  5.在Acquire指令栏中,选择Parameter 

  Description,以决定文件存储位置(folder),文件名称(file),样品代号以及各种参数的标记(panel),即安排tube1,2,3…的检测参数。一般本仪器获取的数据按照检测对象的不同分别储存于FACStation 

  G3\BD Applications \CELLQuest \IMM 和DNA 文件夹中。文件根据日期命名。

  6.在Cytometer指令栏中,选择Counters,将此对话框移至合适位置,以便于随时观察events计数。

  7.将样品试管放至检测区,在Acquire Control对话框中选取Acquire以启动样品分析测定。

  8.微调仪器设定,待细胞群分布合适后选择Acquire Control对话框中Pause, Abort, 

  去除Setup前的“”,开始正式获取信号,存储数据。

  9.当一定数目的细胞被测定后,获取会自动停止,并会自动存储数据。重复步骤7,继续分析下一个样品,直到所有的样品数据分析完毕。

  当所有样品分析分析完毕,即换上三蒸水,并将流式细胞仪置于“STANDBY”状态,以保护激光管。
 

  五.关机程序:
 

  1.从File中选择Quit, 退出软件,选择Don’t Save至苹果屏幕。

  2.用4ml 1:10稀释的漂白水作样品,将样品置于旁位(vacuum is on),以外管吸去约2ml,在将样品架置于中位(vacuum is 

  off),再HIGH RUN 5分钟(内管吸去2ml)。

  3.改用三蒸水4ml作样品,同上处理。

  4.按Prime三次。

  5.此时仪器自动转为STANDBY状态,换2ml三蒸水。必须在仪器处于“STANDBY”状态 

  10分钟后再依次关掉计算机、打印机、主机、稳压电源,以延长激光管寿命,并确保应用软件的正常运行。

  6.填写使用登记表。


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