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SDS-PAGE电泳仪的样品处理方法

2019.12.14

SDSPAGE电泳仪的样品处理方法有还原SDS处理、带有烷基化作用的还原SDS处理和非还原SDS处理等。

一、还原SDS处理:

在上样缓冲液中加入SDSDTT(或Beta巯基乙醇)后,蛋白质构象被解离,电荷被中和,形成SDS与蛋白相结合的分子,在电泳中只根据分子量来分离。

二、带有烷基化作用的还原SDS处理:

碘乙酸胺的烷基化作用可以经久牢固的保护SH基团,得到较窄的谱带。碘乙酸胺可捕集过量的DTT,防止银染时出现纹理现象。

三、非还原SDS处理:

生理体液、血清和尿素等样品,一般只用1%SDS沸水中煮3min。因没加还原剂,蛋白折叠未被破坏,不可作为测定分子量来使用。


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