高效液相色谱仪的心脏色谱柱使用的七大误区
高效液相色谱仪的色谱柱在色谱分析系统中起着分离的作用,是色谱分析核心组成部分。色谱柱的正确使用和维护尤为重要，使用不当会降低色谱柱的效率，缩短使用寿命，甚至造成损坏。本文从七个方面简要介绍了液相色谱柱使用中应注意的问题。
1.避免压力和温度的突变或柱体从高处落下会影响柱体的填充状态；柱体压力的突然升高或降低也会促使柱体的填充，因此应缓慢调整流速以保持填充柱的稳定性。
2.为了避免在需要改变样品溶液的组成时直接改变溶剂的组成，溶剂的组成应当逐渐改变，特别是在反相层析中，而不是直接从有机溶剂到所有水，反之亦然。当用二次洗脱能力强的洗脱液洗涤柱时，流动相在对流系统中的位移应逐渐被混相溶剂所改变。每个流动相的体积约为柱体积的20倍，即常规分析需要50-75毫升。
3.为了避免柱反冲，柱不能反向冲洗，且在本说明书中仅使用高效液相色谱仪的色谱柱，以指示柱可用于反冲洗以除去留在柱上的杂质。否则，反冲洗塔的作用就是迅速降低塔效率。
4.为了避免使用流动相和破坏固定相，使用适当的流动相(特别是pH)来避免固定相损坏。有时可以在采样器前面连接预柱。当分析柱与硅胶键合时，柱前为硅胶，在进入分析柱之前，硅胶可使流动相“饱和”，从而避免硅胶基质在分析柱中溶解。
5不经样品处理，禁止直接进入高效液相色谱仪的色谱柱，使基体的复杂样品，特别是生物样品直接注入柱内，样品需要预处理，样品注射器与高效液相色谱仪的色谱柱之间连接保护柱。高效液相色谱仪的保护柱通常是填充有类似固定相的短柱。
6.禁止在高效液相色谱仪的色谱柱中长期存放缓冲液。柱内填充乙腈或甲醇。应拧紧柱接头，以防溶剂蒸发和干燥。
7.色谱柱使用后，禁止用适当的溶剂清洗。例如，ODS柱用甲醇洗涤至基线平衡，用盐缓冲液作流动相时，使用后用无盐流动相洗涤，可使用含卤化合物（氟、氯、溴）。腐蚀的不锈钢管不应长期接触；安装在液相色谱中的色谱柱应每4-5天开启一次，如果不经常使用，应冲洗15分钟。
