使用CytoFLEX流式细胞仪检测囊泡/外泌体
囊泡/外泌体天然存在于体液中，并稳定携带了一些重要的信号分子。囊泡/外泌体相关功能的研究已经成为研究热点，并有望在多种疾病的早期诊断中发挥作用。
通常，因流式细胞仪无法检测低于 250nm 的颗粒，因而并不是检测囊泡/外泌体微颗粒的最佳选择。而贝克曼库尔特公司的 CytoFLEX 流式细胞仪的问世，为流式检测囊泡/外泌体微颗粒开辟了蹊径。
CytoFLEX是第一台可检测100 nm微颗粒的流式细胞仪，并具有可同时检测13色荧光、单个样本存储量大等优秀性能，为微颗粒的检测提供了理想的检测平台。
材料与方法
1.试剂
2.样本制备
数据分析
建立FSC / VSSC散点图，检测Megamix-Plus FSC beads（100, 160, 200, 240, 300, 500, 900 nm），调整gain值。圈定100 nm - 900nm微颗粒分布区域，设定门MP Gate。同样电压条件下，样本检测管分布于MP Gate门内的即为囊泡/外泌体微颗粒；
2.建立AnnexinV-FITC/APC双参数散点图，通过AnnexinV表达量的多少，区分不同类型的微颗粒。并建立CD63-PE/CD41-PC7双参数的散点图，来检测不同类型的囊泡/外泌体微颗粒，细胞表面抗原的不同。
*实验数据由Kaluza软件分析
结果
1. Megamix-Plus FSC beads 检测结果
根据微球（100, 160, 200, 240, 300, 500, 900 nm）的分布，界定微颗粒的位置，将门命名为”MP Gate”。
2. 囊泡/外泌体微颗粒检测结果
图A中MP Gate显示囊泡/外泌体微颗粒；图B和C为相应荧光通道中，微颗粒的自发荧光；图D中显示两群Annexin-V阳性细胞群标记囊泡/外泌体微颗粒。Annexin-V dim在图中用绿色显示，该群微颗粒表达CD41不表达或低表达CD63，且细胞较小；Annexin-V high在图中用红色显示，该群微颗粒表达CD41+CD63+，且细胞相对较大。
