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HEp-2-NS1细胞人喉表皮样癌细胞复苏操作流程

2021.2.22

1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置

2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液

3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后取出,1-2min

4. 将冻存管喷酒精后放入超净台内,擦干管壁,用 1ml 头将细胞转移到已加培养液的离心管中

5. 800-1000rpm 离心 5min,注意配平

6. 将离心好的细胞弃上清,加入 5ml 完全培养基重悬,用移液管吹打 8-10 次, 避免产生气泡,将细胞悬液接种到 250px 培养皿中,补加 5ml 培养液

7. 混匀,十字法或者 8 字法

8. 将混好的细胞放入培养箱中培养

 


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