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杂交信号的放大实验——地高辛标记探针的信号

2019.4.07
实验材料

杂交信号

试剂、试剂盒

地高辛SSCBSA荧光素

仪器、耗材

加湿盒水浴锅培养箱

实验步骤

1.  用地高辛标记的探针与切片杂交并洗片(见“荧光原位杂交实验”基本方案步骤1~6)。

 

2.  加50 μl 10 μg/ml 的羊抗地高辛抗体Fab片段于玻片上,盖以22 mm2 大小的Parafilm 膜,置37℃温育30 min。


3.  移去Parafilm 膜,分别在4×SSC、0.1% Triton X-100/4×SSC、4×SSC中洗片,每次15 min。

 

4.  吸去残余4×SSC,加50 μl 地高辛信号放大溶液于玻片上,盖以22 mm2 的Parafilm 膜,放加湿盒中。加湿盒外裹以铝箔,置37℃温育30 min。

5.  重复步骤3冼片。

 

6.  复染,加盖玻片并镜下观察结果(见“荧光原位杂交实验”基本方案步骤9~12)。

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