糖类染色实验——糖原染色
| 实验方法原理 | 糖原由多糖衍化而来，是单纯的多糖。糖原易溶于水，所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原，常用高碘酸（periodic acid）-Shiff 反应（PAS）染色法。 |
|---|---|
| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 实验步骤 | 高碘酸氧化液：高碘酸 0.5 g，蒸馏水 100 ml。此液溶解后放入冰箱中待用。 Schiff 染色液：碱性复红 1 g，1mol/L 盐酸 20 ml，焦亚硫酸钠（偏重亚硫酸钠）2 g，双重蒸馏水 200 ml。先将 200 ml 双重蒸馏水煮沸，稍有火焰，加入 1 g 碱性复红，再煮沸 1 min，冷却至 50℃ 加入 20 ml1mol/L 盐酸，待 35℃ 时加入 2 g 焦亚硫酸钠。室温中 2 h 之后见稍带红色，5 h 之后变为无色液体。棕色瓶内装好，放入冰箱中保存待用。 1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。 2. 蒸馏水洗 2 次。 3. 高碘酸氧化液处理 10～20 min。 4. 充分蒸馏水洗。 5. Shciff 液染色，染色 10～20 min（如果室温在 15℃ 以下时，可在湿盒内加入温水而加快反应）。 6. 流水冲洗 3 min（对于着色较深的切片可适当缩短时间）。 7. 用 Mayer 明矾-苏木精液染细胞核 3～5 min。 8. 0.5％ 盐酸乙醇液分化 30s，自来水浸洗 2 min。 9. 无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。 展开 |
| 注意事项 | 1. 糖原固定必须及时取小块组织进行固定，防止固定不透或不均现象。 2. Schiff 试剂使用时的吸管要清洁，当室温较低需加热时，要注意染色不能较深，防止影响染色效果。 |
| 其他 | 结果：糖原物质呈红色，细胞核呈蓝色。 |
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