瘦（Clenbuterol）肉精定量检测新方法
针对 GB-T22286-2008 所述瘦（Clenbuterol）肉精定量检测方法处理步骤，微色谱生物科技优化该方案，提供新方法处理步骤。
1、样品前处理
（1）备样
a. 收集待检测的肉类、组织类样品；
b. 将待检测的样品捣碎（普通食品加工机器或均质仪均可）。
（2）称量
a. 称取 250 mg 搅碎的禽畜肉样品于 2 mL 离心管中。
注：称量精确至 1 mg，总质量可控制在 250 mg ± 10 % 的范围内，但在最终计算时要根据实际称重计算。也可以称量 2 g，定容后取 250 μL 进行后续分析。
（3）水解
a. 加入 250 µL 磷酸钾缓冲液 (pH 7.4, 20 mM)，充分混匀；
b. 加入 5 µL IMCSzyme® β-葡萄糖醛酸酶，轻度涡旋混匀；
c. 37 ℃ 水解 2 小时。
注：如果使用其他公司的酶产品，水解时间应延长至 12 小时，水解缓冲液参照酶的最优反应条件而定。
（4）混匀
a. 于待测样品中加入 25 μL 内标工作液 (10 ng/mL)；
b. 用均质仪均质。
注：使用 Benchmark BeadBlaster 24 组织均质仪的参考参数为：Speed 4.5 M/S, Cycle 01，Time 30 s。
（5）振荡离心
a. 在上清液中加入 800 µL 甲基氰；
b. 用涡旋振荡器振荡 1 分钟，
c. 于 13000 rpm 离心 1 分钟。
（6）浓缩
a. 取上层清液 (约 1 mL) 至新的离心管中；
b. 氮气吹干；
c. 加入 750 µL 水；
d. 涡旋振荡使残渣充分溶解，备用。
2、样品的纯化
人工方案
a. 将实验室通用 1 mL 移液器刻度调至 1 mL，连接 DPX TipsTM 枪头式分散固相微萃取柱，依次用 500 µL 甲醇 、500 µL 水润洗；
b. 将平衡后的 DPX TipsTM 浸入残渣溶液中，上下提取、排放样品溶液 4 次；
c. 依次用 750 µL 水、2% 甲酸/水溶液及甲醇洗涤微萃取柱。
d. 用新鲜配制的 500 µL 5% NH4OH/甲醇溶液洗脱。
半自动方案
a. 移液系统+DPX 混合模式吸头，可在 10 分钟之内提取装载有样本的单个 96 孔板，以备 LC-MS/MS 分析所用。
-
仪器推荐
-
仪器推荐
-
仪器推荐
-
仪器推荐
-
仪器推荐
