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精油检测之高效液相色谱法和气相色谱法的区别在哪里？

2020.1.04

精油检测之高效液相色谱法和气相色谱法的区别

应用范围

气相

由于分离性能好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等技术条件的限制，用气相色谱法分析沸点过高或热稳定性差的物质比较困难一般情况下，500℃以下不易挥发或易分解的部分可采用衍生法或裂解法。

液相

高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此，不受试样挥发性的限制对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大大于400以上的有机物（些物质几乎占有机物总数的75％～80％）原则上，都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析据统计，在已知化合物中能用气相色谱分析的约占20％，而能用液相色谱分析的约占70～80％。

精油检测之高效液相色谱法和气相色谱法的区别

气相仪器构造

气相

由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。

1. 柱箱：

色谱柱是气相色谱仪的核心，样品中的组分在色谱柱中重复分布后被分离，所以分析的目的是安装色谱柱由于色谱柱的两端分别与进样器和检测器相连，进样器和检测器的下端（接头）插入柱盒柱箱可安装各种填料柱和毛细管柱，柱(样)需要在一定的温度条件下工作，柱箱的温度由微机控制，柱箱内的梯度较小，设计合理。

对于某些成分复杂、沸点范围宽的样品，柱盒也可用于三级温度程序控制。且程序设置完成后，自动运行无需人工干预，冷却时也可自动开门排热..

2. 进样器：

注射器的作用是将样品送入色谱柱对于液体样品，喷射器也必须蒸发。因此，采用微机控制喷油器的温度。

根据色谱柱的不同和进样方法的不同，有五种注射器可供选择：

填充柱进样器

毛细管不分流进样器附件

毛细管分流进样器附件

毛细管分流/不分流进样器

六通阀气体进样器

精油理化指标检测之高效液相色谱法和气相色谱法的区别

3. 检测器：

检测器的作用是将样品的化学信号转化为物理信号（电信号）检测器也需要在一定的温度条件下才能正常工作，因此采用微机对检测器进行温度控制。

根据各种样品的化学和物理性质，有五种检测器可供选择：

氢火焰离子化检测器（FID）；

热导检测器（TCD）；

电子捕获检测器（ECD）；

氮磷检测器（NPD）；

火焰光度检测器（FPD）；

4. 数据处理系统：

该系统能够对测试数据进行采集、存储、显示、打印和处理，从而正确地进行样品的分离、制备和鉴定。

高效液相仪器构造

液相

高效液相色谱仪主要由注射系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。

1. 进样系统

一般使用：膜片喷油器或高压喷射之间完成注射操作，取样量是恒定的。有利于提高分析样品的重复性。

2. 输液系统

该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分高压泵的一般压强为l.47～4.4×107Pa流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的流动相贮存错和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、pH值或改用。

精油理化指标检测之高效液相色谱法和气相色谱法的区别

3. 分离系统

该系统包括色谱柱、连接喷嘴和恒温器。

当色谱柱长度一般为10-50cm，需要同时使用两个色谱柱时，可在两个色谱柱之间加一个内径为2-5M的连接管，连接管采用优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成。柱上设有直径为5-10μm的固定相，由基体和固定液组成。固定相中的基质是由高机械强度的树脂或硅胶制成，它们与硅胶表面一样惰性，此外，硅酸基因的表面已被机械涂覆，这与气相色谱固定相的制备相同，或与不同长度碳链或配体的磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或烷基等多种基因化学偶联的有机化合物。

因此，具有不同固定相对结构的这类物质具有良好的选择性如在多孔硅胶表面偶联豌豆凝集素PSA可以分离成纤维细胞中的糖蛋白。

另外，固定相质粒体积小，柱床容易达到均匀致密状态，容易降低涡流扩散效应基质的粒径小，微孔浅，样品在微孔区域的传质短这有利于减小带宽，提高分辨率。根据塔效理论分析，基体尺寸越小，理论塔板数n越大。

进一步证明，当基体颗粒尺寸较小时，分辨率会得到提高。此外，高效液相色谱(HPLC)的恒温器可以将温度从室温调节到60℃。通过提高传质速率和缩短分析时间，可以提高色谱柱的效率。

4. 检测系统

高效液相色谱中常用的检测器有三种：紫外检测器、差折射检测器和荧光检测器

（1）紫外检测器

检测器适合于检测紫外(或可见)吸收样品。

其特点：应用范围广如蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等；

灵敏度高检测下限为10-10g/ml；

线性范围宽；对温度和流速变化不敏感；能检测梯度溶液洗脱的样品。

（2）示差折光检测器

通过差分折射率检测器可以检测出来自流动相的任何不同折射率的样品，该检测系统可用于碳水化合物的检测。该系统通用性强，操作方便，但灵敏度低（检测限为10-7g/ml）。流动相的变化会引起折射率的变化。因此，不适合痕量分析或梯度洗脱样品检测。