蛋白质的生物合成标记实验(三)
实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 准备和用[35S]甲硫氨酸标记细胞,用0.2~1 mCi/ml 的[35S]甲疏氨酸脉冲标记细胞5~30 min。
2. 脉冲标记后,除去[35S]甲硫氨酸培养基,用10 ml 于37℃追加培养基冼细胞1次,加入10 ml 追加培养基继续培养。
3. 在37℃温育至设定时间。悬浮培养细胞在盖紧盖子的试管中旋转温育,贴附培养细胞在37℃ 5%CO2的加湿培养箱中培养。
4. 于4 ℃300 g 离心收集悬浮培养细胞,弃上清。 |
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