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HPLC液相色谱柱柱压升高原因

2019.9.27

HPLC液相色谱柱柱压升高原因

    色谱柱是液相色谱的心脏,在液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱压升高一般是由于柱床内产生了杂质,造成流体阻力加大所致。格莱普多年从事色谱行业,积累了一些经验,您可按照以下建议,逐项排除原因:

1、流动相的前处理 。杂质堵塞色谱柱进口滤片,导致压力升高。这往往是由于流动相没有过滤,或虽已过滤但过滤不彻底,使固体杂质滞留于滤板上所造成的。 

2、样品的沉淀 。当溶解样品的溶剂与流动相不一致时,样品进入色谱柱,有时可能因溶解度降低而沉淀出来,造成压力升高。

3、晶体的析出 。使用含有缓冲液的流动相时,缓冲液中的无机盐可能会残留在体系之中,它们会因在新流动相中的溶解度降低而析出,造成流体阻力加大、压力升高。 

4、细菌或霉菌孳生 。霉菌在流动相中、管路中或柱子进口处繁殖、生长而堵塞滤板,导致压力升高。所以在使用磷酸盐缓冲液时一般要现配现用。 

5、溶质吸附 。当溶质在柱子上有较强的吸附,且所用的流动相难以将它们洗脱时,累积的未洗脱溶质也会造成阻力增大和压力升高。

6、流动相更换过度较快 。当改变流动相体系时,不彻底的更换使不同性质、互不混溶的流动相存在于同一个体系之中,也会造成压力升高。


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