D-PBSA 的配制与灭菌
实验方法原理 | 不断地搅拌将干粉溶解,调整至终体积,检测 pH 和传导率,按预订量分装进行高压灭菌。I>PBS 干粉 |
---|---|
实验材料 | D-PBS 干粉 超纯水 |
试剂、试剂盒 | 搅拌粒 |
仪器、耗材 | 容器 抽吸器 硼硅酸盐玻璃器皿 传导率测量仪或渗透压计 pH 计 高压灭菌器 高压灭菌胶带或无菌指示标签 |
实验步骤 | 1. 在容器中加入1L 超纯水。 2. 将容器放到磁力搅拌器上,转速设定为20 r/min 左右。 3 . 打开 D-PBS 干粉的包装或取 10 个药片,慢慢地加人容器中边加入边搅拌。 4. 一直搅拌到干粉完全溶解。 5. 检测样品的 pH 和传导率,并做记录。 (a) pH 的变化不应超过 0.1 个单位(不同的配方 pH 可能不同)。 (b)传导率的变化不应超过 15 μS/cm 的 5% 。也可选择测定渗透压(或都测),每批之间应该显示类似的传导率。 (c)丢弃测量用样品,注意不要加回到原液中。 6. 将容器中的液体分装到有刻度的瓶子中。 7 . 盖好瓶盖,密封。用带有弹力胶的纸包裹盖子是非常有用的,在纸上写上曰期和瓶中物品的名称,做出标记,这样还可避免从瓶子上将标签取走。 8 . 贴一小片高压灭菌胶带或无菌指示标签,并写上日期。 9. 将密封的瓶子放到高压灭菌器中,121°C , 100 kPa (1 bar, 15 lb/in2),20 min。 10. 室温保存溶液。 |
注意事项 | 作为一项质量控制方法, 检查这些参数了解传导率, 以确保配制过程没有错误是非常重要的。对培养基的任何调节(如渗透压) 都必须在进行了质量控制之后进行。 |