酶活力测定的影响因素

影响酶活性的因素包括底物的浓度、酶浓度、酶反应的最适pH、最适温度、酶的激活剂、抑制作用，另外还包括试剂中表面活性剂的作用等因素。

1.反应速度：大多数酶促反应是可逆反应，其速度既受底物浓度的影响，也受产物生成量的影响。酶反应动力学中所指速度是反应的初速度。

当底物浓度较高时，在反应的初期，其浓度变化甚微，产物生成量也很少，此时反应速度可看作是恒定的。

2.底物浓度：

米氏方程是反映酶促反应速度与底物浓度关系

[S]：底物浓度。

ν：不同[S]时的反应速度。

νmax：最大反应速度。

Km：米氏常数。

Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。

Km值是酶的特征常数之一，只与酶的性质有关，而与酶浓度无关。

不同的酶，Km值不同。同一个酶有几种底物时，则对每一种底物各有一特定的Km值，其中Km值最小的底物一般称为该酶的最适底物或天然底物。

3.测定酶活力时需注意

（1）酶促反应过程中，要用初速度表示酶促反应速度。

（2）要规定时间、温度、pH等反应条件，并在酶测定过程中保持这些反应条件的恒定。

（3）配制的底物浓度应准确且足够大，底物液中应加入不抑制该酶活力的防腐剂并保存于冰箱中，以防止底物被分解。

（4）标本要新鲜，应保存于冰箱中。用血浆时，应考虑到抗凝剂对酶反应的影响。在采血、分离血清时，应注意防止溶血和白细胞的破裂。

（5）在测定过程中，所用仪器应绝对清洁，不应含有酶的抑制物，如酸、碱及蛋白沉淀剂等。