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简述手性HPLC测定血浆中的妥卡尼对映体

2022.12.01

  (1)色谱条件。色谱柱:Spherisorb ODS-2柱(120nm×4.6nm,5um)。流动相:甲醇-0.2mol.L磷酸钾缓冲液(pH 5.0)-水(30:1:9)。流速:1.0mL·min。检测:紫外362nm。

  (2)样品测定。取血浆1mL(含内标物1.2mg·mL盐酸苄胺水溶液25.0uL),加100mg固体碳酸钠调pH为11时并涡旋混合,通过用甲醇1mL和20mmol·L磷酸钾缓冲液1mL(pH10)活化好的固相萃取柱,样品用甲醇0.5 mL洗脱,洗脱液加入衍生化试剂1 mol·L (-)-氯甲酸薄荷醇酯的乙腈溶液20uL,衍生化3分钟,取反应液20 uL进样。保留时间:R-妥卡尼,4.8分钟;S-妥卡尼,5.2分钟;内标物,6.4分钟。

  (3)方法准确度和精密度。回收率:R-妥卡尼,96.6%~116.5%;S-妥卡尼,96.5%~115.5%。RSD:R-妥卡尼,<12.2%;S-妥卡尼,<11.5%。

  (4)线性范围和检测限。线性范围:1.0~20.0ug·mL。检测限:1.0 ug·mL。

  (5)说明。本法用于妥卡尼在家兔体内的药物动力学研究,发现两个对映体在分布和消除上没有显著性差异,且无互相诱导转化作用。

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