使用液体闪烁计数器测量瞬时化学发光强度的方法
1 材料和方法
将FJ一2115自动液体闪烁计数器(西安262厂生产)顶盖打开,移去测量室顶都铅盖,装上专门加工的带有注射小孔的铅盖,并加用黑色橡皮垫圈,以避免光线透入。选择相加测量方式,利用荧光素酶ATP发光体系对改装的装置进行测试:①用NaOH一甘氨酸缓冲液将荧光素酶(中科院上海植物生理研究所)配制成3.5mg/ml的浓度②将ATP标准(德国B.M公司)用Tris—HC1缓冲液稀释成1×10 -8mol/L,l×10 mol/I,……1×10 -11mol/L的标准系列浓度。③分别取各标准液200uL加入发光管中。④将发光管送人测量室后.从注射孔注入800 uL荧光素酶溶液,测6s的发光值N。
2结果
2.1发光测量
将各标准液的6s发光值Ni减去本底值No,并取对数得:Yi=lg(Ni-No),将浓度c取对数得:Xi=lgCi,以Yi为纵坐标,Xi为横坐标作图(图1)。
FJ一2115的测量结果与LKB一1251(瑞典LKB公司生产的发光分析仪)的测量结果具有良好的相关性(r=098),且FJ一2115的灵敏度略高于LKB1251。
2.2稳定性
对同一浓度的ATP分别用IKB1251和改装的FJ一2ll5液体闪烁计数器重复测量20次,其误差分别为7.8和8.1,两者结果相近.无显著性差异。
2.3改装的FJ一2115对B射线谢量的影响
改装前。H的测量效率为51.2%.本底为15CPM,品质因素为58.25改装后H的测量效率为51.1,本底为48CPM,品质因素为54.4。
3 讨论
液体闪烁计数器是用来测量p射线的专用仪器,有两个光电倍增管,采用符合测量方式(即两个光电管同时有信号时才给出信号.否则无信号输出)。如果用它来测量诸如生物化学发光之类的单光子事件时,则需采用相加测量方式,这样,其测量效率就比单光电倍增管的专用发光分析仪要提高一些,同时噪声信号也会有所增加。本研究将自动液体闪烁计数器改装成能及时加样及时测量的发光分析仪,其测量性能与专用发光分析仪相近,有些指标还要好于专用发光分析仪。发挥了一机多能的作用,在不增加投资的条件下,为拥有液体闪烁计数
器的单位开展化学发光分析研究提供了方便。改装后的液体闪烁计数器同样可以测量p射线。
