不同的基质杂质含海量是不同的,我用 C18 分析时有可能一次就污染了,我用高流速,和反向冲洗都解决不了,是不是这根柱子就废了,有没有其他的办法?

答:高流速反向冲洗是对的,关键你用了什么溶剂冲洗呢?用原来的流动相冲洗肯定不管用,要不然就不会累积在柱子上了。你应该用流动相中的强溶剂 B 冲洗,如果不行,就需要启用再生的程序,当然再生时用的溶剂更强。

100%甲醇 ---100%乙晴 ---75%乙晴 / 25%异丙醇 ---100%异丙醇 ---100%二氯甲烷 ---100%正己烷

用每种溶剂冲洗至少 10 个柱体积,对于 250mm×4.6mm 的分析柱,合适的冲洗流速是 1～2ml/min。最后用 10 柱体积的异丙醇过渡,然后回到原来的流动相体系。

再生还不解决问题,最后一招就是挖补柱头填料,把柱头污染的填料挖掉,用干净填料填补进去。挖补填料,破坏原有柱床结构,挖补后柱效也不可能有新柱水平,或许能再维持一段时间,但不会长久。