概述脱氧核糖核酸的超速离心方式

　　近代质粒DNA分离纯化以从大肠杆菌中分离为代表，鉴于大肠杆菌（E.coli）在分子生物学研究中的重要地位，从大肠杆菌（E.coli）中分离纯化质粒DNA（Plasmid DNA）成为超离心技术中一个重要课题。而质粒DNA的快速分离纯化又对超离心设备（超速离心机、转头和附属设备）提出了更高要求。

　　针对E.coli的显微结构待点，在进行超离心分离纯化质粒DNA之前的预处理顺序是：

　　沉淀物可以在加入TE缓冲液（10mM Tris-HCL， lmM EDTA，pH8.0）后，采用分子筛技术去除蛋白和RNA； 也可以用超速离心法去除蛋白质和RNA，去线状DNA或DNA断片。

　　质粒DNA超速离心的分离方法

　　传统的分离方法：数年前，由于受设备条件限制，质粒DNA的分离一般用CsCl平衡等密度离心法，自形成梯度。以10~12ml单管容量为例，用甩平转头分离，36.000rpm×60小时，用角式转头分离45,000rpm×36小时，前者包括加减速在内共用去1.3亿转驱动部寿命，后者也要用去1亿转驱动部寿命，这对当时超速离心机总寿命为100~200亿转来看，无疑每次实验费用过高，加上CsCl用量多、价格贵等因素，使这类分离纯化工作成为非常昂贵的实验。