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紫外可见分光光度计测试数据不准确检查的方法

2018.7.27

摘要:由于紫外可见分光光度计紫外光照射样品,致使试样发生光化学反应,从而引起样品的浓度变化,会使测试结果不准确。这种现象的发生时,应该注意对样品进行避光保护,一般是用黑纸包住样品或采用棕色器皿装样品。

紫外可见分光光度计测试数据不准确检查的方法

①试样是否光解    由于紫外可见分光光度计紫外光照射样品,致使试样发生光化学反应,从而引起样品的浓度变化,会使测试结果不准确。这种现象的发生时,应该注意对样品进行避光保护,一般是用黑纸包住样品或采用棕色器皿装样品。

②测试波长是否合适    由于测试波长不合适,可能会因为摩尔吸光系数不同,致使灵敏度不同,所以产生分析测试误差。因此,要认真选择测试波长。一般来说,要选择最大吸收波长作为测试波长,可以保证得到较大的信号,从而提高性噪比,保证分析测试数据的可靠性。

③比色皿是否沾污  比色皿沾污是很重要的问题,有时测试熏差增大,就是比色皿沾污的结果。除数据不准外,有时,出怪峰、负峰,也是比色皿沾污所引起的。如比色皿沾污,可以用20W的玻璃仪器超声波清洗30min,一般都可以解决问题。但是绝不能采用大功率超声波来清洗比色皿,否则会损坏比色皿。目前国内外的各类比色皿,一般都是分为烧结或粘接两种。不管是哪一种,只要用大功率超声波清洗,肯定会毁坏比色皿。所以,使用者一定要认真对待比色皿沾污的问题。

④注意截止波长般不能选择靠近截止波长附近作为测试点,因为靠近截止波长附近的信号可能很弱,仪器的检测限不好,有时测不出结果,或者测试误差很大。尤其是试样的吸收波长位置,一定要选择在比截止波长长的地方,千万不能选择在比截止波长短的地方,否则得不到测试结果。

⑤SBW是否合适  因为每个样品都有自己的最佳分析SBW,只有在最佳SBW下才能得到最小的分析误差。要检查SBW是否有问题,可以不断改变SBW,薑至信号峰不增加时为最佳SBW。

⑥检查扫描速度  因为扫描速度与噪声是一对矛盾。当扫描速度过快时,噪声会很大;而噪声是主要分析误差的来源,一般来讲,有多大的噪声,就会使测试结果增加多少误差。。所以,当分析误差太大时,应该检查扫描速度是否合适;在要求分析误差很小时,最好采用慢速扫描,在其他条件合适的时候,慢速扫描可以得到准确的数据。在作基线平直度(BF)时,慢速扫描更为重要。

⑦检查仪器的噪声  因为噪声是主要分析误差的来源,所以当分析误差增大时,应该注意根据噪声的测试方法,对仪器噪声进行检查测试。

⑧注意仪器条件的选择  当分析误差增大时,应该全面检查仪器条件;如波长、杂散光、噪声、基线平直度、SBW、扫描速度等。

⑨注意参比池的吸光度(A)值是否过大  一般来讲,参比池的吸光度应在1以下,最好在O.6一o.9为最佳。

⑩其他  我们知道,分析测试的数据不准确,有很多是非仪器因素引起的。例如,样品的代表性(采样、送样或抽样等)、样品的消解(固体样品的粉碎)、称样(天平误差;一般分析天平档次为l/10000时,读数精度为O.1mg,称量范围>lOOmg,误差<O.1%;档次为1/1OOOOO时,读数精度为O.Olmg,称量范围> lOmg,误差<O.1%)、稀释(量具误差)、试样过期、仪器条件的选择、仪器安放的环境(周围的电磁场干扰、

温度、湿度等)。我们在分析过程中如果发现数据不准确时,应该严格地检查这些非仪器因素引起的误差,要充分注意到这些非仪器因素。有时,非仪器因素在分析误差中占主要成分(大约可以占70%~75%)。


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