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如何选择符合您需求的HPLC或UHPLC色谱柱?(四)

2020.4.13

图10:加速柱稳定性研究:pH 1.9时80℃

酸性暴露条件:

流动相:5:95 MeOH/0.1% TFA(溶于水中)(pH 1.9)

流速:0.20 mL/min

温度:80 ℃

色谱柱尺寸:50 x 2.1mm

分析物:菲



使用设计用于加速柱降解下的条件,ACE C18-AR相显示保留损失极少,其寿命相当于高度稳定的ACE C18相。两种固定相均由相同的超纯硅胶而制成,而且比Zorbax SB-C18的耐久性更好(Zorbax SB-C18曾视作在高温和低pH条件下具有极好稳定性的固定相)。

正如预期的那样,基于低纯度硅胶(Waters Spherisorb ODS2)的C18键合柱在这些加速条件下寿命大大降低。

特别值得注意的是常规苯基色谱柱与ACE C18-AR的寿命比较结果。与ACE C18-AR相比,尽管使用高纯度二氧化硅,苯基色谱柱的寿命仍降低,这表明ACE C18-AR可能适用于那些使用苯丙基色谱柱寿命短的应用。

将HPLC和UHPLC连接到通常被称为LC-MS的质谱仪上已经相当普遍。

然而,质谱对可能从HPLC/UHPLC色谱柱上洗脱下来的微量的键合相(称为柱“流失”)非常敏感。柱流失可能会干扰分析结果,并且重要的是,LC-MS应用中所选择的色谱柱具有足够稳定的键合相以避免过量的柱流失。

图11表明ACE C18-PFP色谱柱几乎没有“流失”干扰LC-MS分析。

C18-PFP(以及ACE C18和ACEC18-AR)的稳定性使得这些色谱柱更适合LC-MS应用。

图 11:ACE C18-PFP色谱柱的低柱流失使其成为LC/MS应用中的理想选择

条件

色谱柱尺寸:50 x 3.0 mm

流动相:梯度:在5分钟内从5至95% B,95% B时持续5分钟

A: 0.1%甲酸(溶于水中)

B: 0.1%甲酸(溶于乙腈中)

流速:0.43 mL/min

温度:60ºC

检测:安捷伦1100 MSD ESI正离子快速扫描模式,快速扫描全50 – 1000 m/z

样品:空白运行


柱流失可能会干扰LC-MS应用中目标分析物的检测和测量。

ACE C18-PFP色谱柱未显示柱流失。

所有ACE色谱柱的低流失特性使其非常适合LC-MS应用。

UHPLC色谱柱可能缺乏耐用性。加上入口筛板堵塞的可能性,您可能面临色谱柱的耐用性不如HPLC色谱柱的问题。

ACE Excel色谱柱非常宽容,并提供您期望从HPLC色谱柱中获得的相同耐用性和使用寿命。

ACE Excel将改变您对UHPLC色谱柱耐用性的看法。

ACE Excel色谱柱不仅填装的更好,还采用了ZL的入口筛板设计,使其比其它UHPLC色谱柱更不容易被堵塞。

仍建议您像使用任何UHPLC色谱柱一样过滤样品和流动相,但ACE Excel色谱柱比其他UHPLC色谱柱更为宽容,并提供与HPLC色谱柱相同的耐用性和使用寿命。

图 12:ACE Excel色谱柱在耐用性方面有良好的口碑


将2.1×100mm ACE Excel C18 UHPLC色谱柱在平均1,000 bar(14,500 psi)压力下进行2000多个梯度的运行。

在该稳定性研究结束时,柱效(塔板数)和保留时间基本保持不变。

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