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T-H糖蛋白的提取步骤

2022.6.07

取正常人尿液20升,加入等量蒸馏水稀释。放固体氯化钠于尿液内,使其浓度达。0.58mol/L,充分混匀后于4℃静置48小时,此时,可见白色絮状沉淀物形成。弃去上清液,将沉淀物低温(4℃)离心(3000r/min,30分钟)将离心后的沉淀物用0.58mol/L的氯化钠溶液反复洗3次,然后,溶于一定量的蒸馏水中,对水,置4℃透析3~5天,每日换水4-5次,以彻底清除残留的氯化钠,最终获得无色透明的粒性液体,即为THP。

分装,冻干,低温保存备用。将提取的THP,按照蛋白质鉴定方法,进行生物学和免疫学纯度的鉴定。主要包括分子量测定,氨基酸组成分析,抗原与相应抗体的特异性免疫电泳等。经上述检验证实,所提取的THP完全符合要求。

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