制备型色谱柱选择指南
制备的目的是从混合物中得到纯物质，即分离—纯化—目标物,制备柱则是完成这一过程的一个工具。其固定相种类和分析柱相似，有硅胶、键合固定相（如C18/C8等）、离子交换树脂 、聚酰胺、 氧化铝、 凝胶等（对填料可以进一步处理提高了分离效果，如：对硅胶进行的硝酸银（或缓冲液）处理）。
其装柱方法，根据固定相颗粒度和柱子的尺寸，有不同的装柱方法，装填越好分离效果越好。如湿法装填，颗粒直径小于20－30um的固定相，柱直径在50mm以内（同分析柱装填方法相似）；还有如径向压缩或轴向压缩，柱长压缩技术，柱直径大于50mm时采用。这种方法，先将固定相悬浆（或偶尔是干填充物）装入柱中加压，利用物理方法将其压紧。
（轴向压缩图例）
为了加快分离时间和提高分离效率，制备色谱的的进样品量将会很大，这导致制备色谱柱的分离负荷的相应加大，也就必须加大色谱柱填料，增大制备色谱柱的直径和长度，使用的相对多的流动相。然而，当色谱柱上样量加大时，往往会导致柱效急剧下降而得不到纯的产品。制备色谱，要解决容量与柱效之间的矛盾。因此，制备柱的特点往往是：
1. 柱长短、内径大、呈圆饼状。
常用制备柱的柱长与分析柱相仿,一般为20 —50cm ,,而内径为10 —1 000mm ,因此可以在较大的流速下不致产生很高的柱压降,从而获得高的产率。
2. 填料颗粒小，分布窄。
采用直径为10 —20μm 的细颗粒,孔径及粒度分布均很窄的多孔球形或非球形填料替代传统大颗粒(40 —200μm) 、宽分布的无定形填料填充制备柱,因而具有高得多的柱效,通常每米的塔板数在20000以上,有的甚至可达到与分析柱相仿的柱效。
3. 流速高。
流动相的线速一般在5 —10cm/min ,以便提高产率,降低生产成本。 制备色谱柱Φ50mm以内，可以使用预装柱，但是Φ50mm以上就必须使用轴向压缩柱。轴向压缩柱可分为静态和动态轴向压缩柱。一般Φ50－Φ100mm可以使用静态或动态轴向压缩柱，但是Φ100m以上制备柱必须使用动态轴向压缩柱。
（典型制备柱图例）
那么，如何选择一款合适的制备柱呢？
第一步：选择合适的填料。
越小的粒径具有越高的柱效，但是价格更高，并且带来更高的柱压，要求设备的硬件具备更高的压力耐受性。在被测组分的色谱峰与其它色谱峰非常靠近时，就需要更高的柱效，此时较小粒径的色谱填料就显得非常有用。相反，越大的粒径则柱效越低，但价格也相对较低，同时对设备的要求也不高（10um最常用）。
（填料）
第二步：针对蛋白质、多肽类等物质，选择合适的键合相、孔径。
由目前市场需求来看，蛋白质、多肽等类的物质分离纯化十分普遍，其中以C18、C8、C4的键合相居多，如何根据物质分子量的大小，来选择合适的含碳量和粒径是个非常重要的问题。而相同粒径不同孔径的效果也有不同，如120A、300A等，因此，孔径的选择也十分重要。
（孔径和粒径的关系图）
（Ultimate 系列120A孔径分布检测图）
第三步：选择合适的柱管。
样品的上样要与色谱柱的交叉截面面积相对称，要选择色谱柱的内径要适合于样品的上样量（21.2最常用）。越长的色谱柱具有越高的柱效和更高的样品承载量，但是柱压将会更高，同时分离时间可能会更长（250mm最常用）。
第四步：确定合适的流速和上样量
制备型色谱柱的流速：一般与直径的平方成正比。举例：4.6mm分析柱流速设为为1mL/min，10mm制备型色谱柱可以为1*（10/4.6）2，约为4.7ml/min。
上样量的多少即超载多少，这是为了节约溶剂、节省时间、增加柱子的使用率，因此上样量都是超载的。但并不是超载越多就越好，因为超载越多、塔板数越低。一般情况下，是否超载过量，可以以柱效下降一半为标准，在此基础上再超载，所得到的物质纯度就会受到影响，反而达不到目的。
允许平头峰：
一般情况下，可参考下图：
