主要用途

　　YIJI蛋白质硝酸银染色试剂是一种旨在使用硝酸银通过固着、清洗和染色，直接在聚丙烯酰胺凝胶上显

　　色，在清晰背景上产生灵敏度10 纳克以下蛋白质的银色条带的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科

　　学家精心研制、成功实验证明的。其适用于蛋白电泳包括 IEF 的检测。产品即到即用，性能稳定，操作便

　　捷，敏感度高，显色清晰，重复性好。

　　技术背景

　　硝酸银（AgNO3）的银离子与蛋白质结合后，化学还原成可见的金属银，而显示染色效果。通常用于蛋白

　　聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测。可与质谱分析兼容。

　　产品内容

　　YIJI 固着液(Reagent A) 毫升

　　YIJI 处理液(Reagent B) 毫升

　　YIJI 净化液(Reagent C) 毫升

　　YIJI 染色液(Reagent D) 毫升

　　YIJI 显色液A(Reagent E) 毫升

　　YIJI 显色液B(Reagent F) 微升

　　YIJI 终止液(Reagent G) 毫升

　　YIJI 脱色液A(Reagent H) 毫升

　　YIJI 脱色液B(Reagent I) 毫升

　　产品说明书 1 份

　　保存方式

　　保存 YIJI 染色液(Reagent D)在 4℃冰箱里，避免光照，其余的保存在室温下，有效保证 12 月

　　用户自备

　　塑料盘：用于染色的容器

　　无离子水：用于稀释试剂盒溶液

　　恒速震荡器：用于染色操作时的孵育

　　实验步骤

　　实验开始前，完成SDS-PAGE 蛋白电泳的运行，取出 的胶体，作好定向标记，然后进行下列操作：

　　一、固着处理

　　1

　　1． 准备 个 毫升的烧杯，作好 至 号标记

　　2． 抽取 毫升 YIJI 固着液(Reagent A)到 号烧杯，加入 毫升无离子水，混匀

　　3． 加入到 大小的染色盘

　　4． 将聚丙烯酰胺凝胶放进染色盘

　　5． 在室温下恒速（ RPM）震荡器上孵育 分钟，

　　6． 同时抽取 毫升 YIJI 处理液(Reagent B)到 号烧杯，加入 毫升无离子水，混匀

　　7． 小心倒掉染色盘里的 YIJI 固着液(Reagent A)

　　8． 加入 毫升 号烧杯里稀释的 YIJI 处理液(Reagent B)

　　9． 在室温下恒速（ RPM）震荡器上孵育 分钟

　　10．小心倒掉染色盘里的 YIJI 处理液(Reagent B)

　　11．重复实验步骤 两次

　　12．同时抽取 毫升 YIJI 净化液(Reagent C)到 号烧杯，加入 毫升无离子水，混匀

　　13．加入 毫升 号烧杯里稀释的 YIJI 净化液(Reagent C)到染色盘

　　14．在室温下恒速（ RPM）震荡器上孵育 分钟

　　15．小心倒掉染色盘里的 YIJI 净化液(Reagent C)

　　16．重复实验步骤 一次

　　二、染色处理

　　17．直接抽取 毫升 YIJI 染色液(Reagent D)，加入到染色盘

　　18．在室温下恒速（ RPM）震荡器上孵育 分钟

　　19．小心倒掉染色盘里的 YIJI 染色液(Reagent D)

　　20．加入 毫升自备的无离子水

　　21．在室温下恒速（ RPM）震荡器上孵育 分钟

　　22．小心倒掉染色盘里的无离子水

　　23．重复实验步骤 一次

　　三、显色处理

　　24．同时抽取 毫升无离子水到 号烧杯

　　25．加入 微升 YIJI 显色液 A(Reagent E)和 微升 YIJI 显色液 B(Reagent F)，混匀

　　26．加入 毫升 号烧杯里的 YIJI 显色工作液到染色盘

　　27．在室温下恒速（ RPM）震荡器上孵育 至 分钟，蛋白质银色条带开始显现（注意显色不要过深）

　　28．小心倒掉染色盘里的 YIJI 显色工作液（如果染色过深，见实验步骤 30）

　　29．直接加入 毫升 YIJI 终止液(Reagent G)，直至完成所有拍照和分析

　　四、脱色处理

　　30．如果染色过深， 移出 毫升 YIJI 脱色液 A(Reagent H)和 毫升 YIJI 脱色液 B(Reagent I)

　　到 号烧杯，加入 毫升无离子水，混匀

　　31．加入 YIJI 脱色工作液到染色盘，

　　32．在室温下恒速（ RPM）震荡器上孵育，直至条带颜色回到满意状态

　　33．小心倒掉染色盘里的 YIJI 脱色工作液

　　34．加入 毫升无离子水清洗

　　五、质谱分析预处理

　　2

　　35．如果需要进行质谱分析，移出 微升 YIJI 脱色液 A(Reagent H)和 微升 YIJI 脱色液

　　B(Reagent I)到 毫升离心管，加入 微升无离子水，混匀

　　36．小心切下蛋白条带凝胶体

　　37．放进 毫升离心管，直至条带完全脱色

　　注意事项

　　1． 本产品为10 X 25 毫升规格

　　2． 每25 毫升试剂盒溶液用于处理6cm X 8cm 大小胶体；每50 毫升试剂盒溶液用于处理12cm X 12cm 大

　　小胶体；胶体越大，用量增加

　　3． 操作时须戴好手套

　　4． 必须用无离子水稀释试剂溶液试剂

　　5． 孵育温度为室温

　　6． 本公司提供3％(YJ12034.1)、8％(YJ12034.3)、10％(YJ12034.4)SDS-PAGE 溶液以及蛋白质考马斯

　　亮蓝染色试剂盒(YJ30003)、YIJI 蛋白质尼罗红染色试剂盒（YJ30007）、YIJI 蛋白质 SYPRO 橙

　　色染色试剂盒（YJ30008）

　　质量标准

　　1． 本产品经鉴定性能稳定

　　2． 本产品经鉴定染色效果出色