双歧杆菌血凝特性的研究(二)
2、结 果
2.1 双歧杆菌的血凝活性 3株青春型双歧杆菌对6种红细胞的血凝滴度见表1,3株细菌均能凝集6种红细胞,菌株间及各种红细胞间无显著差异。
表1 双歧杆菌血凝滴度
菌株 | 人O | 人B | 绵羊 | 兔 | 鸡 | 小鼠 |
标准株 | 1∶4 | 1∶4 | 1∶4 | 1∶2 | 1∶4 | 1∶4 |
1027株 | 1∶4 | 1∶4 | 1∶4 | 1∶2 | 1∶4 | 1∶4 |
1124朱 | 1∶4 | 1∶4 | 1∶4 | 1∶2 | 1∶4 | 1∶4 |
2.2 生长条件对双歧杆菌血凝的影响 双歧杆菌分别于硫乙醇酸盐液体及双歧杆菌选择性固体培养基生长后,分别与人O型及人B型红细胞进行血凝试验,结果见表2,固体培养的双歧杆菌的血凝滴度略低于液体生长者。液体生长的双歧杆菌用原耗尽培养液上清悬浮后具有血凝活性,而用新鲜培养液或BPS悬浮则无血凝活性;单独耗尽培养液上清也具有血凝活性。说明,耗尽培养液上清中含双歧杆菌血凝素。
表2 液体及固体培养双歧杆菌血凝滴度的比较
菌株 | 液体培养双歧杆菌 | 耗尽
上清 | 固体培养
PBS悬浮 | ||
悬 浮 | 新鲜培养液 悬浮 | PBS悬浮 | |||
标准株 | 1∶4 | - | - | 1∶4 | 1∶2 |
1027株 | 1∶4 | - | - | 1∶4 | 1∶2 |
1124株 | 1∶4 | - | - | 1∶4 | 1∶2 |
2.3 双歧杆菌血凝素的确定 为确定血凝素的性质,观察了耗尽培养液上清经各种处理后对血凝的影响,结果见表3,血凝活性能被BSA及NaOH抑制;不受胰蛋白酶及温度的影响。根据这一结果,对双歧杆菌血凝素进行了初步提取,证实其血凝素为LTA。
表3 耗尽培养液上清经各种处理对血凝的影响
处理因素 | 耗尽培养液上清 | ||
标准株 | 1027株 | 1124株 | |
对照 | + | + | + |
胰蛋白酶(25mg/ml) | + | + | + |
胰蛋白酶(12.5mg/ml) | + | + | + |
BSA(50mg/ml) | - | - | - |
BSA(25mg/ml) | - | - | - |
BSA(12.5mg/ml) | - | - | - |
NaOH(0.1N) | - | - | - |
100℃ 10min | + | + | + |
注:*对照组及各处理因素均为37℃
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