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关于液相色谱试验时遇到的相关问题解析

2022.2.12

  1、除了流速外,还有哪些因素能引起压力改变?

  改变流动相组成和温度;改变柱长、柱内径和填料粒度;柱突然阻塞压力升高(正常情况下其它条件不变柱压都是逐渐升高的)。

  2、什么是强溶剂、弱溶剂?

  改变流动相的组成或溶剂溶剂强度就可以改变峰容量因子和保留时间。在一定条件下,减少保留时间或缩短分析时间的溶剂为强溶剂,增加保留时间或延长分析时间的溶剂为弱溶剂。

  3、怎样才会使峰位发生重排?

  在分析多组分样品时,仅改变流动相的强度(组成百分比)而不改变其组成,一般仅仅改变所有组分的保留时间,不会发生峰位的重排。

  下列条件改变可能发生峰位重排:

  流动相中换了强溶剂;

  pH值的改变;

  柱填料的改变;

  柱温的改变;

  流动相的组成改变(如,加入离子对试剂三乙基胺等)。

  4、 除了在线脱气,常用的实验室脱气方式还有哪些?

  加热回流脱气,脱气效果最佳,但无法保持;氦脱气,此方法脱气效果佳,能除去百分之九十以上的空气,但氦气价格太贵,所以用的不多;真空脱气,效果仅次于氦脱气,但脱气过程中容易造成样品溶液挥发损失;超声脱气,只能脱去约百分之三十的空气,但,在实验室中最常用。目前还是尽量争取用在线脱气,方便且效果好。

  5、评价一个色谱柱的最基本指标有那些?

  评价一根色谱柱的基本指标是:塔板数、峰不对称因子、柱压降、适用范围和键合相浓度以及峰容量。

  6、什么是时间常数?

  时间常数实际上是响应时间的设定,起着过滤噪音的作用。时间常数太小(太快)可能增加短噪音,时间常数太大(太慢)可能出宽峰、拖尾峰。

  7、为什么在实验过程中有时会出现倒峰?

  所用的流动相在检测波长下有吸收,而进在此波长下没有吸收或吸收低于流动相的溶液,在流动相中会出现洞穴,通过柱后出现倒峰。

  8、为何会出现“胖”峰和平头峰?怎样避免?

  用比流动相强度大的大体积样品进样,通常会损害色谱图的质量,而出现“胖”峰和平头峰。应遵循下列规则选用溶剂溶解样品:

  (1)最好用流动相溶解样品进样;

  (2)用大体积弱溶剂溶解样品,如,反相色谱中用水溶解样品进样,主要缺点是每次进样后在色谱图的开头出现大的负峰,有时还波及到样品峰;

  (3)需要时用强溶剂溶解进样。

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