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酵母质粒载体具备的条件有哪些?

2022.10.06

  一个理想的基因载体应该具有以下几个基本条件:

  ①能在宿主细胞进行独立和稳定的DNA自我复制,并在其DNA中插入外源基因后,仍然保持着稳定的复制状态和遗传特性;

  ②易于从宿主细胞中分离,并进行纯化;

  ③在其DNA序列中,具有适当的限制性内切酶位点(最好是单一酶切位点)。这些位点位于DNA复制的非必需区内,可以在这些位点上插入外源DNA,但不影响载体自身DNA的复制;

  ④具有能够观察的表型特征,在插入外源DNA后,这些特征可以作为重组DNA的选择标志。

  上述基本条件主要是从原核生物DNA重组中得出的。到了真核生物阶段,由于将外源DNA引入宿主的方法有了改进,突破了原有要求重组DNA片段的大小限制.因此使得外源DNA进入宿主的能力增强了;同时.由于筛选重组体技术的改进,原来要求载体或外源DNA上有选择标记已经被杂交技术、免疫学技术等替换,从而扩大了DNA重组技术使用的范围。所以,作为载体的最基本要求有了改变,即要有自主复制能力和可利用的限制酶切点。

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