实验技巧:流式细胞仪细胞周期结果分析

2018年7月13日 13:35:14 来源: 互联网
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*张是未转染的第12代,第二章是转染后的第22代。

*张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):21.7%

第二张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%

据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比*张图的S期有所增高,但G2期下降了。

细胞周期是基于细胞处于不同分裂时期具有不同的DNA含量而分析细胞处于不同的时期的方法。确切的说结果中G1期的百分比实际上是G1+G0期细胞的百分比。 G2的百分比实际上是G2+M期细胞的百分比。

图上zui高的峰代表了G1期(也称2倍体峰),后面的代表G2期、S期(也称4倍体峰)。

1、细胞周期的概念

细胞由一次分裂结束到下一次分裂结束,都要经历相同的变化阶段(即G1→S→G2→M )周而复始地进行活动,细胞的这种生长、分裂循环即称为细胞周期(cell cyc1e)。一个细胞周期包括有丝分裂期(M)和分裂间期(G1、S、G2)。尽管在各种细胞中各期所占时间都不尽相同,但相对而言M期zui短,S期却较长。

2、分裂间期

(1)G1期

前一次有丝分裂完成到S期开始。各种与DNA复制有关的酶明显增多,线粒体叶绿体核糖体增多,内质网在更新扩大,高尔基体、溶酶体都增加,中心粒彼此分离、复制。

(2)S期

DNA、组蛋白合成

(3)G2期

S期结束后到有丝分裂开始。由上可以看出G2期、S期、M期反映了细胞的增殖活性,特别是G2期、S期(因M期较短)。因而,G2/M%+S%反映了细胞增殖能力。二者有无差别要进行统计检验。

3、细胞周期阻滞

对于生殖细胞及保持增殖能力的细胞(如干细胞),由于细胞不断的增殖, 细胞总是处于从G1 、S、G2 和M 期的连续的细胞周期中。 在细胞周期的各阶段, 细胞分别进行着DNA 复制、蛋白质合成细胞分裂等重要的生理活动。每一阶段都是下一阶段的准备期, 真核细胞可以在启动下一个周期前监测与一个细胞周期顺利完成相关的生化事件,这包括各种体内外因素威胁下游事件进行时可逆地将细胞周期阻滞在特定的生理阶段的能力,而这种特定的生理阶段称为检定点(checkpoint) 。只有前一阶段的生理活动完成后,才能通过称为检定点的阶段,进入周期的下一步,一些突发事件引发的细胞反应能影响驱动细胞周期前进的因子,从而使细胞周期停滞在检定点, 这被称为细胞周期阻滞(cell cycle arrest)。

比较相应的细胞G1 、S、G2 期差异有无统计学意义,才能说有无细胞周期阻滞。


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