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科华酶标仪KHB ST-360酶标仪SOP文件

2019.6.26

 【名称】KHB ST-360

【仪器编号】

【制造厂商】上海科华实验系统有限公司

【经销商】上海科华公司 地址:上海市钦州北路1198号84号楼1楼

【联系人】 电话:

【到货时间】**年*月

【安装位置】HIV筛查

【安装日期】**年*月

【安装人】

【启用日期】**年*月

【受培训人员】

【培训时间】**年*月

【仪器管理责任人】

【仪器维修部门】上海科华公司

【维修工程师】 电话:

【仪器使用说明书名称】KHB ST-360酶标仪用户手册

【仪器使用说明书存放位置】HIV筛查实验室

【仪器作业指导书存放位置】

【仪器手册保管人】

1 目的

规范仪器设备的操作程序,保证酶标仪的正常状态。

2 适用范围

本实验室KHB ST-360酶标仪的操作。

3 操作人员

本实验室实验人员。

4 操作步骤

4.1 开机

将酶标仪后部的开关打开,仪器将显示正在自检,随后显示当前的测量方式和计算方式及“准备就绪…”。在自检过程中,仪器对每一个已装的滤光片选择合适的光强度,等待1分钟预热。

注:仪器显示测量方式和计算方式是在两个页面,须按【↑】【↓】键查看,后续相同。

4.2 将待测板放置于载物台上

4.3 按【↑】【↓】键以选择待测项目的相应程序(每个通道存放的程序已由本室人员根据试剂盒的要求事先输入)。

4.4 按【开始】键进行扫描。

4.5 仪器扫描后,正常情况下屏幕即显示96孔测试结果。显示结果为+、-值时为一页,显示结果为浓度或吸光度值时分二页,须用【↑】【↓】键翻阅查看。

4.6 打开打印机电源,放上A4 纸,打印出测试结果。

4.7 关闭酶标仪及打印机电源。

5 键盘功能

5.1 【打印】:打印屏幕显示结果。

5.2 【功能】:选择仪器功能。

5.3 【测量方式】:选择测量方式。

5.4 【计算方式】:选择计算方式。

5.5 【开始】:开始检测。

5.6 【退出】:从设置功能项或样品测试中退出。

5.7 【清除】:在确认前更正数据。

5.8 【确定】:对输入模式和输入参数确认。

5.9 【↑】:向前查阅模式和参数。

5.10 【↓】:向后查阅模式和参数。

6 编制测试程序

6.1 测量方式

6.1.1 按【测量方式】键,参照屏幕显示按1~6中的任一数字键或按【↑】、【↓】键移动并按【确定】键,选择所需的测量方式。

6.1.2 当选择了测试方式中的某一项后,有相应的参数需要设置。

6.1.2.1 单波长检测

参数设置:波长值和空白方式。

当选择单波长方式后,参照屏幕显示可按A~H中的任一字母键或按【↑】、【↓】并确认所需波长,按【确定】键,再按屏幕显示可按1~4中的任一数字键或按【↑】、【↓】移动并确认,选择空白方式。

(1)当选择多孔试剂空白时,参照屏幕显示可设置A1~H12的任一位置,按【确定】键后在相应位置上出现黑点。用户可设置最多8空白位置,当设置完相应的空白位置后,按【确定】键退出。注:仪器始终保持前一次所选状态,开始选择后,仪器会自动重新刷新,按【清除】键可恢复上一次的空白设置。

(2)当选择列空白时,参照屏幕显示可选择1~12的任一数字键,按【确定】键后,则在相应列上出现一列黑点。列空白即为每行采用各自不同的空白。

(3)当选择行空白时,参照屏幕显示可选择任一字母键,按【确定】键后,可在相应行上出现一行黑点。行空白即为每行采用各自不同的空白。

6.1.2.2 双波长检测

参数设置:第一波长值和第二波长值、空白方式。

选择双波长时,参照屏幕显示可选择A~H中的任一字母键或按【↑】、【↓】键选择第一/第二波长后,按【确定】键,再进行空白方式选择。其空白方式同单波长空白方式设置。

6.1.2.3 双时法检测

参数设置:波长、空白方式、间歇时间,其中波长及空白方式设置同上。

当设置完空白方式,参照屏幕显示可按相应数字键依次输入时、分、秒。注:最短间歇时间为5秒。

6.1.2.4 动力学法检测

参数设置:波长、空白方式、间歇时间、延迟时间、全部时间,其参数设置同上。注:最短间歇时间为5秒,全部时间必须大于间歇时间与延迟时间之和。

6.1.2.5 多波长检测

相应参数为第一列波长、……、第十二列波长及空白选择,设置方法同上。

6.2 计算方式

仪器的计算方式有九种,当选择了计算方式中的某一项后,有相应的参数需要选择和设置。

6.2.1 吸光度法:结果以吸光度形式输出,无需参数设置。

6.2.2 因子计算法:测出的吸光度值和用户给出的因子相乘得出浓度,浓度单位由因子单位确定。浓度根据以下公式计算:

浓度 = 因子 × 吸光度

参数设置:因子。

6.2.3 标准浓度法:用户输入标准品浓度,酶标仪通过这些标准品,用所选公式拟合成曲线,通过标准曲线,可将测量得出的吸光度换算成浓度。

参数设置:拟合公式及相应系数和标准品的序号、位置、浓度。

6.2.4 标准曲线法:用户输入所选拟合曲线的A、B、C、D值来确定标准曲线,酶标仪用该曲线方程来计算浓度。

参数设置:拟合曲线及相应拟合曲线系数。

6.2.5 单限检测法:仪器测出的吸光度与用户定义的或按公式计算出的一个极限值比较,如果低于极限值,会出现负号“-”。相反,会出现正号“﹢”。如果极限值为负,出现结果相反。

参数设置:极限值、系数A、B、C及阴阳性。

6.2.6 双限检测法:仪器测出的吸光度与用户定义的两个限值比较。如结果低于两个限值,会出现负号“-”;如结果在两个限值之间,出现“0”;如结果高于两个限值,会出现正号“﹢”。

参数设置:低极限值、高极限值。注:低限值必须小于高限值。

6.2.7 等级检测法:用户定义的数值被分成10个部分,10个部分编号为0~9。测出的吸光度值根据它所在的部分以0~9中的编号反映出来。

参数设置:等级范围值。

6.2.8 列减法:第二列结果减去第一列结果,第四列结果减去第三列结果,或反之。

参数设置:列减方法。

6.2.9 两点法:用户输入标准品浓度,仪器通过标准品计算出点到点的标准曲线。通过这一曲线,将测得的吸光度值转换成浓度。

参数设置:标准品的序号、位置及浓度,设置方法与标准浓度法相同,只是拟合时点到点之间为一条直线。

6.3 功能设置

6.3.1 样品盘运动方式

用户可按A~D中任一字母键或按【↑】、【↓】键选择样品盘运动方式并按【确定】键确认。

6.3.2 结果输出处理

屏幕中,A、B为对应项,C、D为对应项,E、F为对应项,用户只能选择对应项中的某一项。

6.3.3 每盘标准处理

用户可按A、B选择或按【↑】、【↓】键选择每盘标准处理方式,并按【确定】键确认。注:只对计算方式3、9有效。

6.3.4 存储当前内容

用户可按A、B选择存储程序还是结果,按1~50选择存储的号码。仪器共可存储50个程序设置和50次测量结果。

6.3.5 调用已存内容

可按A、B及1~50调出上面一步(存储当前内容)中存储的内容。

6.3.6 打印已存内容

6.3.7 滤光片设置

输入要更改的位置和波长。建议:用户不可随意修改该项设置。

6.3.8 时钟设置

按A、B、C、D、E键选择进行相应设置。

6.3.9 恢复默认值

7 校正程序

7.1 滤光片波长精度检查

将不同波长的滤光片从酶标仪上卸下,用UV-2201型紫外-可见分光光度计(波长精度±0.3nm)于可见光区对每个滤光片进行扫描,其检测值与标定值之差为滤光片波长精度。一般酶标仪无585nm滤光片,可选用550nm或630nm滤光片。450nm 滤光片的检定选用普鲁兰溶液(校正波长为630nm)。

7.2 通道差与孔间差检测

通道差检测是取一只酶标板小孔杯(杯底须光滑,透明,无污染以酶标板架作载体, 将其(内含200ul甲基橙溶液吸光度调至0.500A左右)置于8个通道的相应位置,蒸溜水调零,于490nm处连续测三次,观察其不同通道的检测器测量结果的一致性,可用极差值来表示。孔间差的测量是选择同一厂家,同一批号

酶标2板条(8条共96孔)分别加入200ul甲基橙溶液(吸光度调至0.100A左右)先后置于同一通道,蒸溜水调零,于490nm处检测,其误差大小用±1.96s衡量。

7.3 零点飘移(稳定性观察)

取8只小孔杯分别置于8个通道的相应位置,均加入200ul蒸馏水并调零,于490nm处每隔30分钟测一次,观察各个通道4小时内吸光度的变化。

7.4 精密度评价

每个通道3只小杯分别加入200ul高中低3种不同浓度的甲基橙溶解,蒸馏水调零,于490nm作双份平行测定,每日测二次(上下午各一次),连续测定20天。分别计算其批内精密度,日内批精密度,日间精密度和总精密度及相应的CV值。

7.5 线性测定

用电子天平精确称取甲基橙配制5个系列的溶液,于490nm平行测8次,取其均值。计算其回归方程,相关系数及标准估计误差s,并用±1.96s表示样品测量的误差范围.双波长测定评价:取一分甲基橙溶液,分别加入3种不同浓度的溶(测定波长为490nm,校正波长为585nm),先后于8个通道检测,每个通道测3次,比较各组之间是否具有统计学差异,以考察双波长消除干扰组分的效果。

8 自校规范

8.1 测定原理:根据样品OD值计算样品中抗原或抗体的浓度。

8.2 校准条件:仪器正常工作需要以下环境:温度18~25℃,湿度45~85%RH,电压220V。

8.3 品:选择卫生部质控血清或公认质量好的质控品严格按照操作说明进行。

8.4 校准方法:每日测定HBsAg质控品,月底计算CV值。

8.5 校准步骤

8.5.1 按照操作说明进行校准测定。

8.5.2 RCV值的测定,在日常工作条件下规范操作,每一个质控项目连续测定20天。

8.5.3 对检测结果进行统计学处理,计算出靶值、标准差(SD)、变异系数(CV)。

8.5.4 用RCV的测定结果建立室内质控,判断标准以《管理与技术规程》为准。

9 维护保养程序

9.1 保养

9.1.1 为保证仪器持续的稳定性和准确性,应干扰光学系统的任何部件。光路的调校错误会影响测量结果。

9.1.2 保持光学系统的清洁,以确保正常功能和结果的准确,应避免任何液体流入仪器内部,并防尘、防止其它外源性物质,不要用手指摸透镜表面、滤光镜、光电检测器。

9.2 仪器常规清洁

9.2.1 关掉仪器,并拔掉电源插头。

9.2.2 使用一次性手套,用一次性擦布沾水或温和去污剂,清洁仪器外部、导轨和板架。

9.3 清洁光学系统:详见仪器使用说明书。

9.4 消毒方法:在使用危险性的传染性物质后,用以下方法消毒仪器

9.4.1 关掉仪器,并拉掉电源插头。

9.4.2 使用一次性手套,用一次性擦布沾70%乙醇,清洁仪器外部、轨道和板架。

9.4.3 仪器内部消毒,详见仪器使用说明书。

10 配套中文电脑操作

10.1 打开电脑主机及显示器。

10.2 双击进入酶管理系统。

10.3 在“病人资料”菜单确认今日值班。

10.4 在“病人资料”菜单中输入当日化验单的病人资料。

10.5 在“检验报告单”菜单中检查,修改及打印报告单。

10.6 在“酶免疫管理系统”单击进入“中文转换”系统。

10.7 给当日的标本排列及编号。

10.8 根据项目接收酶标仪传送的数据。

10.9 退出“中文转换”及“酶免疫管理”系统。

10.10 单击“开始”选择“关闭系统”等待出现可以安全关机时,关掉主机及显示器。

11 职责

11.1 实验室工作人员应该严格按照本SOP进行操作。

11.2 本SOP的改动,可由任一使用本仪器的工作人员提出,并报经本实验室负责人、科主任签字批准方可通过。








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