拟南芥花粉管苯胺蓝染色
一、方法和试剂
母液
1. 冰醋酸
2. 乙醇
3. 1 M NaOH(氢氧化钠)
4. 100 ml 1 M K2HPO4（磷酸氢二钾）
5. 100 ml 1 M KH2PO4（磷酸二氢钾）
6. 苯胺蓝（Fisher）
7. 甘油
工作溶液
1. 冰醋酸含量为10%的乙醇溶液（固定组织使用）
2. 50 mM 偏磷酸钾溶液：4.17 ml 1 M 磷酸氢二钾+0.83 ml 1 M 磷酸二氢钾+995 ml 水，pH7.5
3. 苯胺蓝含量为0.01%的KPO4溶液（染色）
4. 含有50%甘油的偏磷酸钾溶液（封固剂）
二、仪器
1. 紫外显微镜
三、步骤
1. 在1.5 ml 离心管里加入250 μl 冰醋酸，将雄蕊浸泡到冰醋酸里至少固定1.5小时。如果需要可将组织过夜固定。
2. 将固定完的组织浸泡在1 M 氢氧化钠溶液里过夜处理，是组织软化。
3. 用偏磷酸钾洗植物组织三次。（在这个阶段植物组织是易碎的）
4. 用200 μl 苯胺蓝对组织进行染色5-10分钟或者最久可以染色10小时。
5. 染色后，将组织放置到载玻片上在紫外显微镜下观察。如有需要可以压片观察。
推荐
热点排行
一周推荐
