白血病免疫分型中假阴性，孰之过
做淋巴瘤免疫分型的FLOWER应该碰到不少这种情形：临床表现很像淋巴瘤，但偏偏骨髓免疫分型检测时没测到肿瘤细胞，即“假阴性”，这是什么原因呢？是流式的问题吗？
简单的说，可能是，也可能不是。复杂的说，以B细胞淋巴瘤为例，归纳为以下几点：
1、样本采集问题
对于血液或体液样本，是不会存在这种问题的，但是如果换成骨髓标本或组织标本，就可能存在这种问题。骨髓标本还好，除非是骨髓不均匀的肿瘤细胞浸润病灶，或骨髓瘤破坏骨髓可能会出现采集问题。但组织样本就很可能会在采集的时候漏掉了肿瘤部位，所以这种情况下就需要与临床保持良好的沟通，并且需要实验室与临床互动，多次采集送检，直至检出。
2、样本处理时细胞丢失
这个原因尽管不能完全怪流式，但在一定程度也可以说属于流式的错。在B细胞淋巴瘤中，一些大B细胞和浆细胞在处理时特别容易被破坏，从而造成假阴性。因此，在处理标本时，要注意吹打的轻柔、研磨组织动作的细腻，这完全是技术活了。结合一下组织印片或病理的比例，可防止出现此种原因导致的假阴性。
3、肿瘤细胞太少
有些淋巴瘤的肿瘤细胞太少（例如富T/组织细胞的弥漫大B细胞变异型），或者同时混杂了反应性B细胞（例如边缘区淋巴瘤），此时，获取足够的细胞量，以保证足够的异常细胞克隆供我们分析就非常重要。一般建议获取50万～100万的有核细胞是比较好的。
4、异常细胞难区分或易被忽略
有时候，异常B细胞存在，但很难通过散点图区分开来或者是容易被忽略掉。例如经过CD20单抗治疗后，肿瘤性B细胞可能会出现CD20阴性，或者有些异常B细胞的lambda、kappa表达缺失，就很容易被忽略掉，报为正常。
解决方法就是：
1、尽量分析所有细胞
2、不要只使用CD20分析B细胞
3、尽量同时分析CD19、CD20、CD22或CD79
4、分析所有B细胞可能出现的异常表型，不要单凭一个特征。
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