B群链球菌CAMP试验之奇趣现象
B群链球菌(GBS)可以导致孕产妇泌尿系统感染、羊膜绒毛膜炎、败血症和早产；产妇分娩时GBS可经产道传染给新生儿，主要引起新生儿肺炎、败血症和脑膜炎，新生儿感染时病情常较严重、预后差。因此检测GBS筛查是医院微生物室老师必须掌握的技术之一，实际工作中，我们常用CAMP试验来筛查GBS，让我来和大家聊聊我在实际试验过程中遇到的一些有趣现象吧。
首先回顾下基本原理和操作方法：GBS能产生一种较为特殊的蛋白质，我们称之为CAMP因子，它能增强金黄色葡萄球菌β溶血毒素的溶血活性，在血平板上在两菌的交界处出现矢状（箭头形）的加强溶血区。方法：将指示菌在血平板上划横线接种，再将可疑为GBS的试验菌垂直划线接种，两者相距3-4mm，孵育24小时查看结果，阳性结果如图2：
有一次，我连续观察CAMP试验，如图3为孵育48小时形态，24h时箭头没有那么大，箭头后面那根溶血线如图中所标示（图片忘记拍了）。当时我想：24h和48h时溶血线如此平行意味着什么呢？那根溶血线是否是金葡菌β溶血毒素的扩散线？
于是我想了个办法，又做了一次试验。我故意在接种时将金葡菌划弯，而GBS在划线时依然保持竖直。发现金葡菌接种划线和箭头后面的那根溶血线果然走势一致，如图4。看来我的猜测虽然没有经过严密的金葡菌β溶血毒素检测证实，但是后面那根溶血线应该和金葡菌的β溶血毒素的扩散密切相关了！
可是发现了上述现象又有什么用呢？平时工作中，各位老师们有没有遇到比较奇怪的溶血现象呢，我是有遇到几次但是忘记拍下来了，不过我用GBS和ATCC25923模拟了这一现象，老师们看图5吧
这样的溶血环是不是很熟悉呢，图5中点种了9个金葡菌，其它的则是在金葡菌周围不同距离点种的GBS，形成了不同的溶血图案！这这块平板上，您能迅速指出哪些是金葡菌吗？也有刚进入微生物室的老师经常会问，这是什么溶血现象呢，不是圆形的溶血环还这么奇形怪状，会是什么菌？这时就可以用到前面图3中推测的规律了，金葡菌β溶血毒素在划线接种时扩散的最远处是一条平行线，那么在点种时它的扩散区域应该就是一个圆形了，遇上GBS的CAMP因子就显示出透明的圆形溶血线，也就是说圆弧溶血线中心位置的就是金葡菌了！完全正确！金葡菌点种位置见图6。在日常工作中，我们只要按照这个方法就能迅速的找到金葡菌的位置，当然也有可能是其它葡萄球菌了，在它周边的可能就是无乳了，不过也可以用触酶试验来区分，可能您要多费一些功夫了。
问题结束了吗？没有。我常常在想：为什么不同菌的CAMP试验会出现不同的图形呢？如图7中所示区域，按理说金葡菌的β溶血毒素扩散区域应该是一个长方形区域的，越靠近菌落浓度应该越高，GBS的CAMP因子也应当是如此。为什么图中显示的区域没有溶血？我没有找到合理的解释，只是心中有一个猜测：是否只有CAMP因子和金葡菌的β溶血毒素在浓度比例合适时才出现溶血？过高或过低都不能出现协同现象？不同属的细菌产生的CAMP因子的浓度不一样，只有和金葡菌的β溶血毒素达到一定比例处才出现加强溶血？于是出现了不同的图形。虽然这个问题可能不能带来实际比较有意义的应用，但是我就是个好奇的人！
