BriCyte E6流式细胞仪临床应用集锦（八）—CD64检测感染
感染是导致人类发病和死亡的重要原因，引起感染的因素有细菌、病毒、支原体等，感染的早期缺乏特异性的临床表现，一些自身免疫性疾病的活动期也会出现与感染的相似症状，病因不同在临床治疗上会有很大的区别。传统的感染检测方法如细菌培养、白细胞计数、中性粒百分比、血清反应蛋白（CRP）等存在着检测时间长、特异性和敏感性低等不足，中性粒细胞表面CD64检测感染的检测方面与其他的炎性指标相比更有特异性，对细菌感染的早期诊断以及与非细菌感染、自身免疫性疾病的鉴别诊断有重要的意义。
CD64是一种穿膜糖蛋白，属于免疫球蛋白（Ig）超家族，表达在巨噬细胞、单核细胞和嗜酸粒细胞上。正常情况下，CD64在中性粒细胞表面呈低水平表达，当受到细菌细胞壁脂多糖（LPS）和粒细胞集落刺激因子（G-CSF）、γ干扰素（IFN-γ)刺激时，中性粒细胞表面CD64表达在3-4小时内迅速增高，与感染的严重程度呈正相关；随着感染的控制，疾病的好转，中性粒细胞表面的CD64表达显著下降，可用来指导临床用药，减少抗生素的滥用。
【检测原理】
机体受到感染后中性粒细胞表面CD64表达增强，通过流式细胞仪检测中性粒细胞CD64的荧光强度变化，来辅助判断机体是否受到感染，可用淋巴细胞CD64荧光强度作为内对照。
【试剂】
CD45-FITC、CD64-PE、流式溶血剂、仪器质控微球
【样本制备】
1. 在流式管中加入50ul样本；
2. 按照试剂说明书的要求加入一定量的CD45-FITC和CD64-PE试剂，混匀，避光孵育15分钟；
3. 向试管中加入1×溶血剂450ul，避光孵育15分钟。
【数据采集和分析】
采用BriCyte E6流式细胞仪配套MRFlow软件进行数据采集。
1. 测试仪器质控微球，监测检测通道电压，必要时进行调整；
2. 建立CD45/ SSC散点图，围绕CD45强阳性SSC低值细胞设门P1（淋巴细胞），围绕CD45弱阳性SSC高值细胞设门P2（中性粒细胞）；
3. 建立CD64-PE直方图，显示P1门细胞，围绕细胞设区间门I1；
4. 建立CD64-PE直方图，显示P2门细胞，围绕细胞设区间门I2；
5. 记录淋巴细胞I1门及中性粒细胞I2门的平均荧光强度；
6. 计算：感染指数= 中性粒细胞CD64MFI / 淋巴细胞CD64MFI
