琼脂糖电泳没有条带的原因
如果琼脂糖能正常凝固,那变质可能性不大。
如果连marker都看不见
1.如果不要求回收而只是看带,TBE可以不用灭菌,但是PH值要调,这影响DNA的迁移率。很有可能你的marker都没跑开。
2.可能是荧光染料过期了或者用量不够,可以考虑在合适范围类适当加大用量或者用EB试试,EB毒性大,但是染色能力比低毒染料强。
3.检查marker的保质期,单独跑一次marker,可能这个marker不行了。
4.点样没点好或者制孔没制好,marker孔破洞了。可以考虑把胶浓度适度配高点,胶稍稍做厚点,孔底和胶底的距离适当拉高点,这样制孔的时候比较难破洞,点样的时候即使新手也难戳穿。
等你marker能跑出带后,确定没问题再跑PCR产物,如果PCR产物在无操作失误的情况下没有带,就是PCR条件和引物设计的问题了。
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