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酶标仪软件操作步骤

2018.3.15

一.       软件运行前的连接

酶标仪插上电源,和电脑连接好后,打开电脑和酶标仪开关,酶标仪至少稳定15min后开始读数,效果比较好。注意,当酶标仪处于power on 的状态时,不要手动打开酶标板室和比色皿室的门,以免紫外辐射的伤害或者仪器的损伤。

 

二.软件的运行

1.打开桌面快捷方式SkanIt RE for MSS 2.4.2运行软件,出现Log on To SkanIt software的界面。

2.use name默认为“admin”, password为空

3.OK进入SkanIt software 2.4.2界面,New session-新建任务程序,Open session-打开已有程序。

4.在界面上方的setting中选择Instrument,出现Instrument setting的界面,在Instrument中选中Multiskan spectrum on COM,Themo Electron。点击右侧的setup,在serial number中输入1500-850,然后点击OK。再点击Default instrument右边的connect,即可设定好连接。然后点击close关闭窗口。

 

 

三.New session操作

1.新建任务程序:

点击new session进入protocol options界面,在session name中输入新的程序名称

点击next进入plate layout options界面,在select plate template中选择所需模板类型(一般96孔板选择use default,比色皿选择cuvette,其他的可以选择相应的类型)

输入plate layout name(系统默认的与session name相同)

点击next进入Definition done界面,在select location中选择任务程序所要保存的目的文件夹(该界面可进行新建,重命名及删除文件夹操作)

点击finish完成新建,进入SkanIt software 2.4.2程序操作主界面(主要有三大块: platelayout用于模板区域选择,protocol用于程序编辑,results用于数据处理)。

2.plate layout对模板区域进行选取

点击wizard进入选取模板区域操作界面fill wizard(任务类型type有: blank空白,calibrator标准蛋白,control对照,empty空白,unkown一般为样品)。                  

在右边模板中选取开始点位置,即红圆点所在位置。

选取方向,在Filling order中可通过箭头设定。

对于blank,在No.of replicates中填写好重复数,选择好开始位点和方向,点击Add可完成。

对于calibrator,在No.of calibrators 中填写标准蛋白的个数,在No.of replicates中填写好重复数,选择好开始位点和方向。如有浓度梯度,可选择Generate series进行设置。

例如,取7个浓度蛋白做标准曲线,稀释倍数分别为2040801603206401320,每个浓度重复两次,则在No.of calibrators 中填写7,在No.of replicates中填写2,选择好选择好开始位点和方向。然后选中Generate series,出现conventions的界面,在Initial value中填写20,在operators中选择Multiplystep by中填写2,点击ok

对于control,操作基本和calibrators相似。

对于Empty操作基本和blank相似。

对于unknown,填写好No.of replicatesNo.of unknowns并选择好开始位点和方向,点击Add即可完成。

第一块板填满后,有时会自动进入第二块板的编辑,注意看Fill wizard的模板下方的current plate,如果显示为2/2,则可以直接关掉窗口,模板区域即可编好。

标注:对于单一型任务可先选取全模板【即在No.of unkown选项中设为模板最大孔数】,然后对不要的区域进行删除。

对于非blankempty型任务,若有浓度差,可勾选generate series,然后进行设定:series为有规则的浓度差,multiple values为不规则的浓度差。有规则的可通过运算公式,系统直接算出,无规则的通过键盘输入,点击add进行添加。

3.编辑程序

选好所用模板区域后,点击protocol进入程序编辑界面。

protocol properties所属框内的execution order选项中选中数据读取路径(共有四种,第一种一般为常用路径,一次读四个孔)。

Settle delay选项中设定读数时间间隔。一般比色皿不需要读书时间间隔,设置为零即可,对于测量板而言,由于板在移动过程中液体表面共振波的影响,需要稳定一段时间,一般设置为5s in a 6-well plate300ms in a 96-well plate<20ms in a 384-well plate

steps所属框内空白处或选中程序单击鼠标右键得到应用程序子菜单。

在子菜单中选取你所要运行的程序(如常用的程序有photometric,photometric-scanning,Incubateshake等),并在该程序的选项中设定你所需的参数。一般测蛋白含量选择photometric,在wavelength中设置好波长即可。

所有程序编写好后,在session中点击save保存好模板程序,不保存将无法运行上面所设的模板程序。

4.测读数据

Execution所属框内点击connect链接机器,链接过程中会出现机器状态列表窗口,无异常后点Close关闭。

Execution所属框内点击run plate out弹出酶标板载板,把酶标板底部擦干后放上去后,确保平稳后点击run plate in,等酶标板进去。

Execution所属框内点击Execute session按钮运行所设程序,弹出Run name窗口,点击Ok确认运行。接着会出现读数窗口,不要关闭读数窗口,读数完毕后窗口会自动消失,并弹出酶标板载板。

注:以前,无法进行人工读板,这是因为机器序列号的设置不对,要仔细查看机器上的机器序列号,将正确的序列号填入操作软件中的设置中。

5.数据分析及保存

仪器读数完毕后,系统自动进入Results操作界面,在Result界面所属框中,可对所得数据进行分析。

Result所属框中,单击要分析数据的程序,如测蛋白一般选择的photometric,点鼠标右键得到数据分析方法主菜单。

选择要分析的方法,测蛋白选择Quantitative Curve Fit,出现ParametersGraphTableList可以点击查看结果。

如果需要标准曲线,则在Graph的曲线图中单击右键选择Toolbar,图标上方会出现一系列图标,点击Copy to clipboard选择As a Bitmap,将其粘贴在新建word文档中并保存。

点击Result左侧图标框中选择Export,在Parameters中的select items to report中选择要保存的内容,一般选择layoutPhotometric Quantitative Curve Fit,然后点击Add,在;右边的Report items中出现所选择的内容。

After execution中选中Save to file,通过右下方的Browse选择要保存的文件。注意此次操作可能没有保存到目的文件夹。必须进行以下步骤。

点击上方的Report可看见结果,点击Save选择所要保存到的目的文件夹。并检查是否所有要保存的数据都已经保存到相应文件夹中。

 

三.Open session操作

 若要运行或查看已有的程序,在登录界面点击Open session,打开程序所在文件夹,单击所要运行或查看的程序(提示:在该界面中,点NewFolder可新建文件夹,Rename可对已有文件夹重命名,delete可对程序及文件夹进行删除),点Open打开。然后可进行所需操作。

 

四.仪器的断开与关闭

在读数完成后若要关闭仪器,应先在Execution所属框内点击Run plate in,待酶标板载板进去后,点击disconnect断开仪器,然后再关闭仪器开关,盖好外罩。


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