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HPLC的故障及处理

2020.3.07

(一) 保留时间变化

 

1.柱温变化 柱恒温。

 

2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱。

 

3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液。

 

4.柱污染 每天冲洗柱。

 

5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相。

 

6.柱快达到寿命 采用保护柱。

 

(二) 保留时间缩短

 

1.流速增加 检查泵,重新设定流速。

 

2.样品超载 降低样品量。

 

3.键合相流失 流动相pH值保持在3~7.5,检查柱的方向,

 

4.流动相组成变化 防止流动相蒸发或沉淀。

 

5.温度增加 柱恒温。

 

(三) 保留时间延长

 

1.流速下降 管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡。

 

2.硅胶柱上活性点变化 用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱。

 

3.键合相流失 同前(二)3。

 

4.流动相组成变化 同前(二)4。

 

5.温度降低 同前(二)5。

 

(四) 出现肩峰或分叉

 

1.样品体积过大 用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%。

 

2.样品溶剂过强 采用较弱的样品溶剂。

 

3.柱塌陷或形成短路通道 更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件。

 

4.柱内烧结不锈钢失效 更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品。

 

5.进样器损坏 更换进样器转子。

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