静电离子色谱分离方法
提要 采用静电离子色谱法(EIC), 在ODS载体上涂覆胆汁酸诱导体胶束(CHAPS)进行阴离子和阳离子的同时分离. 以示差析光检测器检测, 分别以纯水、 碳酸盐、 磷酸盐和十二烷基磺酸盐电解质溶液为流动相, 探讨Na2SO4和NaBr, Na2S2O3, NaF和NaNO3, NaNO3和KNO3各离子对的分离条件和分离效率, 以及静态磁场对静电离子色谱的保留时间和分离效率的影响. Separation Method of Electrostatic Ion Chromatography
Shen Guijun, Shi Yuhua, Peng Zenghui, Hou Peng, Yu Aimin
(Department of Chemistry, Jilin University, Changchun, 130023)
Abstract A single reversed－phase
ODS column coated with conjugated bile acid salt micelles(CHAPS) was
investigated for simultaneous separation of inorganic cations and anions
by electrostatic ion chromatography(EIC). The detector of refactometry
was connected on－line to the EIC. Pure water and the electrolytic
solutions were respectively used as the mobile phase to separate NaBr
and Na2SO4, Na2S2O4, NaF and NaNO3, NaNO3 and KNO3. The separation efficiency and retention time of EIC in magnetic field was also studied.
Keywords electrostatic ion chromatography, separation method, magnetic field
近年来离子色谱研究的一个重要趋势是研究各种分离效率高, 选择性好, 分析速度快, 可同时分析阴离子和阳离子的色谱柱. 研究的重点是将涂覆有生物表面活性剂的物质作离子色谱固定相, 并已在光学异构体和无机离子分离分析方面展示出独特的优越性和发展潜力. 1994年， Hu Wezhi等人[1～4]首先采用在一分子内含有正负电荷的两性离子分子的表面活性剂作色谱固定相, 开创了静电离子色谱法. 本文利用自制的静电离子色谱柱, 选用不同种类流动相, 对含有不同阴离子的钠盐进行分离， 并初步探讨在磁场中静电离子色谱的保留行为.
1 实验部分
1.1 仪器和试剂
LC－4A高效液相色谱仪； RID－2AS示差析光检测器, C－R2A数据处理机. 静电离子色谱柱(自制), 流动相分别为水, 10 mmol/L Na2HPO4－NaH2PO4缓冲液(pH=6.8), 2.4 mmol/L NaHCO3和3 mmol/L Na2CO3; 1 mmol/L十二烷基磺酸钠. 所用试剂均为优级纯或分析纯； 溶液用二次蒸馏水按常规配制.
1.2 色谱柱制备和分离方法
把含有胆汁酸盐水溶液通过动态涂层法涂覆在ODS表面.
选用国产ODS分离柱(4.6 mm×250 mm), 将30 mmol/L的CHAPS溶液(经0.4 μm滤膜过滤)以 0.7
mL/min流速流经ODS柱80 min, 收集流出液重复上述操作2次, 然后用水冲洗40 min,
即得到在ODS柱表面涂覆一层含有正/负电荷胶束的静电离子色谱柱.
静电离子色谱法是利用在ODS载体上涂覆在同一分子内同时含有正/负两种电荷的胆汁酸诱导体胶束作固定相,
纯水或电解质溶液作流动相, 被测样品中的阴离子和阳离子通过纯粹的静电吸引、 离子配对后形成正、 负离子的缔合物(离子对),
由于被测离子的电荷和半径、 离子种类和离子浓度的不同,
因此形成的各种离子对受涂覆在固定相上的表面活性剂所带的正/负电荷静电吸引和排斥作用力不同而相互分离. 分离后的离子对进入检测器进行定量检测.
实验表明, 用本法制备的静电离子色谱柱, 连续使用3个月未发现分离效率下降.
2 结果与讨论
2.1 流动相和色谱图
分别以纯水、磷酸盐缓冲溶液为流动相得到的色谱分离图如图1和图2所示.
图1 纯水为流动相的静电离子色谱分离图
浓度为2.0 mmol/L, 流速0.6 mL/min.
全屏显示表格
由图1可见, 纯水为流动相时, Na2SO4和NaBr， KNO3和NaNO3， Na2S2O3和NaF+NaNO3各离子对得到分离, 但NaF与NaNO3不能分离开. 而磷酸盐为缓冲溶液时(图2), 不但Na2SO4和NaBr得到分离, 而且Na2S2O3， NaF， NaNO3也可相互分离.
由图2可见, 与纯水流动相相比, 流动相中磷酸盐的存在使各离子对保留时间和色谱峰形状发生变化, 虽然各离子对保留时间显著增加,
但出峰顺序未发生变化. 实验表明, 各离子对的保留时间与阴阳离子的半径、 电荷、 流动相种类和离子强度有关,
在流动相中加入不同种类的电解质溶液将有利于某些离子对的分离. |
全屏显示表格
|
全屏显示表格
|
全屏显示表格
| 当流动相流速不同时, 各离子对的保留时间发生改变. 图4是纯水为流动相时, NaBr和Na2SO4离子对的保留时间与纯水流速的关系. 实验表明, 当采用不同种类流动相时, 随着流动相流速的增加, 保留时间都有不同程度的缩短. 但要根据被分离的离子对的分离效率和分析速度来选择流动相流速, 本实验选择流动相流速为0.6 mL/min.
2.3 外加磁场对静电离子色谱分离的影响
综上， 在静电离子色谱分离过程中, 由于采用涂覆同时带正/负两电荷的两性分子离子作固定相, 被分离的阴阳离子以离子配对形式被洗脱下来, 虽然可以用一种柱填料同时分离分析阴阳离子, 但必须配备不同种类的检测器以适应阴阳离子的在线检测. 在外加磁场作用下, EIC的不同种类流动相对各种离子对的分离效率、 选择性及其保留机制的影响及作用有待于进一步研究. *国家自然科学基金资助课题. ** 联系人. 作者简介：第一作者，申贵隽，男，41岁，硕士研究生. 作者单位：申贵隽 师宇华 彭增辉 侯鹏 于爱民（吉林大学化学系，长春，130023） 参考文献 |
