RNA样品的转膜（虹吸印迹法）
实验概要
本实验介绍了RNA样品的转膜（即虹吸印迹法）的操作步骤等。
主要试剂
1. 20×SSC：175.3g NaCl，88.2g柠檬酸钠，DEPC水定容1000ml
NaOH调pH至7.0，高压后备用。
2. 6×SSC：用20×SSC稀释。
主要设备
1. 紫外灯
2. 80°C烤箱
3. 紫外交联仪
实验步骤
1．将电泳后的凝胶用蒸馏水漂洗2min，20×SSC浸泡30min以去甲醛。
2．剪一与凝胶大小相等的硝酸纤维素膜，用蒸馏水浸湿后放入20×SSC中。
3．在方盘上放置一平板，其上放置一滤纸，滤纸两端搭入盘内浸入20×SSC中，用玻璃棒赶走滤纸和平板之间的气泡。
4．将凝胶倒置于平台上, 底面朝上，切掉右下角，并用保鲜膜封闭四周以防止吸水纸接触凝胶的边缘从而接触平板造成液流的短路。
5．将硝酸纤维素膜放于胶上，赶走气泡。
6．膜上放两张滤纸，其上再放20层吸水纸。
7．吸水纸上放一平板，其上放500g左右的重物，目的是建立液体从夜池经凝胶向硝酸纤维素膜的上行通路，以洗脱凝胶中的RNA并使其聚集到硝酸纤维素膜上。
8．室温下过夜转膜，持续16小时以上，期间换纸2-3次。
9．完成转膜后，在紫外灯下观察凝胶，以确定转模是否彻底。并标记好序号、加样孔位置和28S，18S的位置，硝酸纤维素膜和凝胶直接接触的一面为正面。
10．用6×SSC浸泡硝酸纤维素膜5分钟，滤纸吸干，80°C烤箱真空干燥2小时-2.5小时或紫外交联仪下5min。如不立即进行杂交实验，则放在干净的滤纸中，室温暂时保存。
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