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通用SPE萃取程序

2019.5.21

主体内容:

        1.反相填料

        活化:

        1)用3-5ml甲醇冲洗填料。

        2)用3-5ml水或缓冲液冲洗,上样前勿让填料流干。

        上样:

        样品加到柱床上,以1-5ml/min.低流速通过填料。若所需样品不会被保留,此时应收集样品作分析。

        洗脱:

        如果样品被保留,使用约5ml极性溶剂(如水、缓冲液或有机溶剂/水混合液)将弱保留干扰物洗出。

        收集:

        用1-2ml非极性溶剂将所需物质洗脱,收集用于分析。

        2.正相填料

        活化:

        用3-5ml非极性溶剂冲洗填料

        上样:

        样品加到柱床上,以1-5ml/min.低流速通过填料。若所需样品不会被保留,此时应收集样品作分析。

        洗脱:

        如果样品被保留,使用约5ml非极性溶剂将弱保留干扰物洗出。

        收集:

        用1-2ml极性溶剂将所需物质洗脱,收集用于分析。

        3.离子交换填料

        活化:

        用5ml去离子水或低离子强度缓冲液(0.001M-0.01M)冲洗填料

        上样:

        样品加到柱床上,以1-5ml/min.低流速通过填料。若所需样品不会被保留,此时应收集样品作分析。

        冲洗:

        如果样品被保留,使用约5ml去离子水或低离子强度缓冲液将弱保留干扰物洗出。

        收集:

        用1-5ml高浓度缓冲液(0.1-0.5M) ,或以缓冲液改变pH,使得样品不再离子化,将所需物质洗脱,收集用于分析。


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