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VP实验——Barritt氏法

2019.4.13

VP实验可应用于: (1)鉴别产气肠杆菌和大肠埃希菌,(2)表征其他细菌群,包括放线菌。

实验方法原理

某些菌属能使丙酮酸脱羧,生成中性的乙酰甲基甲醇,通过 KOH 和空气的作用,使乙酰甲基甲醇(3-羟基丙酮)转变成双乙酰,双乙酰在α-奈酚和肌酸的催化下,生成红色化合物,为 VP 试验阳性。

实验材料

大肠埃希菌产气肠杆菌

试剂、试剂盒

葡糖糖蛋白胨水VP试液甲液(α萘酚酒精溶液)乙液(40%KOH溶液)

仪器、耗材

培养皿恒温箱

实验步骤

将试验菌接种于通用培养基,于36±1°C培养4天、培养液2.5ml先加入5°Cα萘酚(2-na-phthol)纯酒精溶液0.6ml,再加40%氢氧化钾水溶液0.2ml,摇动2—5min,阳性菌常立即呈现红色,若无红色出现,静置于室温或36±1°C恒温箱,如2h内仍不显现红色、可判定为阴性。

注意事项

实验需注意试剂加入顺序,摇匀后静置10min后观察。

其他

1.VP是IMViC系列的四项测试之一,测试了肠道细菌的证据。其他三个测试包括:吲哚测试,甲基红测试和柠檬酸测试。


2.VP阳性生物包括肠杆菌,克雷伯氏菌,粘质沙雷氏菌,Hafnia alvei,霍乱弧菌生物型eltor 和溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)。


3.VP阴性生物包括枸橼酸杆菌属,志贺氏菌,耶尔森氏菌,爱德华,沙门氏菌,弧菌furnissii,河流弧菌,创伤弧菌和副溶血性弧菌。

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