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生物化学检验技术基础知识(三)试剂的配制与使用

2019.12.20

   临床生物化学检验实验需使用大量的化学试剂,因此,了解试剂的规格、性质及特点,掌握试剂的配制、应用及保管等方面的知识,对保证实验结果的准确性,避免和减少不应发生的错误和浪费是非常必要的。 

 

 

一、化学试剂的等级标准

 

 

  市场上供应的化学试剂分国产和国外进口两种。由于各国对生产的化学试剂品级规格不一致,选用时应特别注意。

  (一)国产化学试剂  

 

 

  根据国家标准(GB)或部颁标准(HG)规定,国产试剂一般分四级,各级的名称、符号及主要适用范围见表2—4。

  (二)国外进口化学试剂  

 

 

  国外生产化学试剂规格种类繁多,常见国外进口化学试剂的国别和厂名有USA(美国)、E。Merek(德国)、Fluka(瑞士)、Jap(日本)Light(英国)等。

 

 

二、生物试剂的种类和应用

  生物试剂是用于生物学、医学、药学等学科的科研与实践的专用试剂,分氨基酸、 糖、酶、辅酶、蛋白质、核酸、植物碱、甾类化合物、生物染色素等几大类。生物试剂是探索生命奥秘和生物化学检验中的重要武器。以下仅介绍几种与医学检验有关的生物试剂。

  (一)氨基酸  

  作为试剂用的氨基酸要求含量不能小于98%,比旋光[α]D度应符合要求,其它杂质含量小。氨基酸有D和L构型的区别,使用时应注意选择。

  氨基酸的主要应用:合成多肽和蛋白质的原料,研究多肽和,蛋白质的结构,某些酶促反应的底物,制备培养基用的氮源,配制缓冲液等。

 

 

    (二)酶和辅酶

    酶和辅酶作为生物试剂,现已广泛应用于工农业生产、科学研究和卫生事业的各个领域。在生物化学检验中,酶作为分析试剂具有专一性高、反应条件温和、催化反应速度快、无毒害等优点。酶作为分析试剂,能测定标本中用一般化学方法难于检测的物质。酶分析方法至今已建立了二百多种。可测定一百多种临床生化检验项目,商品试剂盒亦有五、六十种之多。  

 

 

  在分子生物学技术中,限制性核酸内切酶、聚合酶、DNA连接酶等工具酶的发现 和应用,使人类重组DNA、探究基因的愿望得以实现,为基因工程这样一门创造性科学提供了有效的工具。  

  酶是一种生物催化剂,其活性受许多因素的影响;要长期保存而不失去活性是比较困难的。通常,结晶干燥的固体酶制剂比液态酶易于保存,酶试剂最好用深色瓶盛装,置干燥器内,再将干燥器放人低温冰箱,这样能做到低温、干燥、避光的保存要求。

 

 

   (三)核苷酸  

 

 

  作为生物试剂的核苷酸,大多都以核苷酸的钠(钾、锂)盐形式存在,核苷酸的盐类比较稳定,便于保存,易溶解。 在分子生物学技术中,核苷酸用作合成寡核苷酸的原料,制备核酸探针,广泛应用于基因研究和疾病的诊断。  

 

 

  (四)蛋白质

 

 

随着人们对蛋白质研究的不断深入和发展,蛋白质不仅作为被研究对象而且成为一种非常重要的生物试剂,广泛应用于分子生物学和医学领域。如在临床诊断试剂中,蛋白质常用作为载体,利用其分子中具有的氨基、羧基、酚羟基、巯基、羟基、胍基等活泼基团,既可与药物、半抗原等一些小分子物质也可与酶、蛋白毒素等大分子物质以共价键的形式结合,以制备人工抗原、酶标抗体、载体释放药物、抗体导向药物和免疫毒素等,广泛应用于免疫诊断试剂和高效治疗用的靶向药物等。

 

 


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