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应用模式动物斑马鱼开展农药环境毒理的研究(一)

2020.4.20

在未涉及正文分析介绍及阐述之前,首先给大家分享一个关于斑马鱼研究的框架图:


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从框架图可以看出,该研究的目的及主要思路是:评估福美锌(ziram)对斑马鱼发育的影响,主要从形态学、行为、生理学和分子四大方面来进行探讨。毋庸置疑,这也是今天将与大家分享的一篇使用Noldus(诺达思)的DanioVision(斑马鱼行为轨迹跟踪系统)进行斑马鱼研究与分析的文章,发表于2018年9月。研究着重强调以下几点:

  1. 探讨了福美锌(ziram)杀菌剂的毒性对斑马鱼胚胎发育的影响;

  2. 测量了线粒体生物能量学、幼鱼行为和基因表达;

  3. 当福美锌(ziram)浓度>100nM时,会引起致命性、发育性缺陷和脊索畸形;

  4. 暴露于亚致死剂量1nM和10nM 7天之后,幼鱼行为开始发生变化。

01

关于福美锌(ziram)

福美锌(ziram)是一种广谱农药\杀虫剂,化学上称之为:二甲基二硫代氨基甲酸锌 (Houeto et al., 1995; Kanchi et al., 2014),可用作杀虫剂或杀菌剂。1960年首次在美国注册,用于控制苹果和梨子的黑星病、桃子的卷叶病、西红柿的炭疽病和早疾病 (US EPA, 2004)。

福美锌(ziram)与环境和人类健康密切相关,这就需要进一步研究其在非靶标生物和人类中的毒性及作用机制。譬如,流行性病学研究表明,单独使用福美锌(ziram)或与其它农药结合起来使用后,与神经退行性疾病相关,如帕金森疾病 (Fitzmaurice et al., 2014; Rhodes et al., 2013; Wang et al., 2011)。福美锌吞食有害、吸入有高毒性、刺激呼吸系统、对眼睛有严重伤害,对水生生物有极高的毒性,可能对水体环境产生长期不良影响。

因此,量化ziram这类杀菌剂的负面影响,有利于更好地掌握它们与神经性退行疾病之间的关系,从而更好地对毒理、药理进行研究。

02

斑马鱼作为模式动物的优势

斑马鱼是评估神经毒性及神经行为毒性的极佳模式动物,因为它是发展很迅速的脊椎动物,有良好的神经递质系统 (Panula et al., 2010),此外,斑马鱼早期生长阶段对环境污染和药物比较敏感(Jin et al., 2009; Schulz et al., 2010)。

斑马鱼基因与人类基因的相似度达到87%,这意味着在其身上做药物实验所得到的结果在多数情况下也适用于人体;再加上其胚胎是透明的,更容易观察到药物对其体内器官的影响。

已有研究探讨过福美锌(ziram)对斑马鱼幼鱼行为的影响(Lulla et al., 2016)。但研究的具体内容和深度与本研究不同,本研究是从深度、广度两方面将福美锌(ziram)对斑马鱼胚胎发育的影响诠释的淋漓尽致。

03

主要研究结果

斑马鱼行为轨迹跟踪系统 (DanioVision) 是一个完整解决方案,由 DanioVision 观察箱、温控模块, 以及预装于计算机的 EthoVision XT 组成。该系统是用于斑马鱼或其他极小型动物高通量追踪 的创新系统。借助 Noldus 的动物运动轨迹跟踪系统可同时在多孔板高精度追踪多达96只动物。

本研究就是使用了该系统,通过96孔板对斑马鱼在光区、暗区的活动及行为进行观察和分析,再结合其他分析工具和方法,最终得到研究结果。

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表1为在96h之后斑马鱼胚胎中福美锌(Ziram)的LC50值,从表1数据结果,我们可以看出96h时LC50 为1082.54(相当于0.33 mg/L),表明福美锌(Ziram)对斑马鱼胚胎具有较高的毒性。


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