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保护柱的选择及使用步骤

2020.6.15

保护柱的选择

保护柱的选择与更换应注意些什么事项

一、保护柱的选择

选择保护柱的原则是:在满足分析分离要求的前提下,尽可能的选择较短的保护柱结构,对分离样品有比较小的保留性的色谱填料。

在选择保护柱之前首先要考虑的是样品是否清洁。对于大部分分析工作来说,一支1cm长的保护柱便能提供充分的保护作用。但是,如果样品非常不清洁,或工作中要经常更换保护柱,那么就应该选择2cm或3cm长的保护柱。但是,随着保护柱的加长,保留时间也会变长。

保护柱的内径应与分析柱的内径相同或相当。保护柱的填料装填方式也很重要。目前有薄膜装填法的保护柱,使用过程很简单方便,而且可以在实验室中进行干装。但是,其最大的缺点是不经济,特别是针对中国的具体情况,一次性使用相对费用较高。另外,薄膜装填法的保护柱所装填的色谱填料有限,只能提供有限的保护作用;不过也因为所装填的色谱料较少,保护柱的长度也较短,所以对分析样品的保留时间的影响也很小。另一种保护柱结构其实质是缩短了色谱分析拄,设计方式上有直连式、手紧式或整体式。整体式设计是由色谱的生产厂商直接安装在色谱分析柱上的,必须与色谱分析柱一同订货,可以非常方便地使用,但不能够被修改。直连式结构设计可在任何时候有色谱工作者来安装连接,可以与任何品牌的色谱分析柱连接使用,而且还可以根据样品的相关情况选择不同的保护柱长度。手上紧即可。另外从保护柱结构又分为是否可以更换保护柱柱芯。可以降低保护柱的使用成本。

一般来说,保护柱填料的选择是由分析柱的填料决定的,正常情况下可以选择与分析柱一样的色谱填料,但是,根据实际工作的需要,也可以不必与分析柱的填料完全匹配。

二、什么时候应该更换保护柱

当满足下列条件之一时就应该更换保护柱。

a、色谱柱的理论塔片数下降15%以上;

b、色谱柱柱前压上升15%以上;

c、最难分离的物质对分辨率下降15%以上;

d、样品进样次数超过150次;

e、流动相通过1500倍的色谱柱体积。

三、保护柱/保护柱芯更换步骤

  1. 将色谱柱与保护柱断开,将保护柱(或柱芯换下)

2.将保护柱换上(或将保护柱芯所有胶带除去,将柱芯换上,将保护柱接上)

3.将换好的保护柱用甲醇冲洗30分钟

4.将色谱柱接上

四、在线过滤器 预柱 保护柱的原理区别

在线过滤器在泵和进样阀之间,只有筛板,只是物理过滤,

保护柱在进样阀和色谱柱之间,有填料,可吸附物质

预柱是个混淆的概念,pre-column,一般可直译为预混合柱,放在泵和进样阀之间,有硅胶填料,可以降低色谱柱填料被酸、碱流动相溶解

同时也有把预柱当保护柱的

五、清洗

保护柱在清洗时首先要拆下分析柱,以免洗脱物进入分析柱;然后选择适当的流动相进行冲洗。

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