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液相色谱压力偏高之故障排查

2021.2.01

  压力是液相色谱系统中非常重要的技术指标,我们在使用液相色谱的过程中,经常会遇到系统压力偏高,甚至出现超过系统最大耐压而报错的现象。出现这种现象通常的问题就是“堵”了,堵的位置可能是在线过滤器、保护住或色谱柱、进样器或检测器的流通池。如果堵了,需要先确定是保护柱或色谱柱堵了还是系统堵了,可以按照流动相的流路依次分段排查。

  排查色谱柱

   首先排查是否是色谱柱或保护柱堵了,可以将保护柱卸下,如果压力正常,说明是保护柱堵了,需要更换保护柱或保护柱柱芯。将色谱柱的出口断开,如果压力依然很高,再将色谱柱卸下,如果压力很小,说明是色谱柱堵了,需要对色谱柱进行冲洗或更换。

   如果经过排查不是色谱柱或保护柱的原因,则很有可能是系统堵了,需要按照流动相的流路依次排查。

  排查在线过滤器

   在排查保护柱的时候, 将保护柱卸下,并断开流路,如果压力偏高,则很有可能是在线过滤器堵了。或者,在流动相灌注的时候,系统压力偏高,则很有可能是在线过滤器堵了,需要对在线过滤器进行清洗。

  排查进样部位

   对于华谱S3000液相色谱仪,采用的是针在线直接进样方式,如果在平衡色谱柱的时候系统压力正常,进样后系统压力偏高,则很有可能是进样针或针座堵了,需要对进样部位进行清洗和维护。

  排查流通池

   将检测器入口接头断开,如果压力恢复正常,说明很有可能是流通池堵了,需要对流通池进行清洗维护。

  【引起“堵”的因素——样品】

   引起液相色谱堵的原因大多是样品、流动相或缓冲盐使用不当引起的。经过前处理的样品一定要经过微孔滤膜过滤后再进行色谱进样,而且在选择微孔滤膜的时候一定要根据样品溶剂选择有机系、水系或者其他类型的滤膜。

  【引起“堵”的因素——纯水】

   液相使用的纯水最好是“现用现配“,新制备的纯水在实验室放置几天就会长菌,虽然这些细菌用肉眼观察不到,但却很容易进入系统及色谱柱的孔隙,造成堵塞。

  【引起“堵”的因素——有机溶剂】

   使用的甲醇、乙腈及其他有机溶剂最好是购买色谱纯的,虽然市售有很多国产的色谱纯试剂,但质量也是参差不齐,所以在购买前要进行合理的评估。如果有机相需要和水进行混合,则在混合后要进行过滤。虽然纯有机溶剂不容易滋生细菌,但是装入流动相瓶的纯有机溶剂不建议放置时间太长,超过三个月需要进行更换。

  【引起“堵”的因素——缓冲盐】

   配制好的缓冲盐溶液一定要先用0.22μm的微孔滤膜进行过滤。使用完缓冲盐溶液时,及时用纯水将管路中缓冲盐置换出去,再以高比例的水相冲洗色谱柱。由于缓冲盐是用纯水配制的,所以放置时间长很容易滋生细菌,所以缓冲盐溶液一般不建议一次配制后长时间使用。有些实验员为了节约时间,一次配制很多缓冲盐溶液,过滤后放置于冰箱中随用随取,这样低温下很容易有缓冲盐析出,从而堵塞色谱系统。

  绝大多数的色谱故障是人为因素引起的,所以在使用液相色谱的时候一定要养成良好的使用习惯,做好平常的维护保养,可以有效降低仪器故障率,延长仪器的使用寿命。


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