关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

T4噬菌体的装配步骤介绍

2022.7.28

  1、头的装配

  噬菌体的头壳是最大、最复杂的部分,其头部(head)的结构组成涉及20个基因,这些基因分成两大簇集中排列在基因组上。T4的前头部(head)由衣壳蛋白gp23以及主要的装配核心蛋白gp22和上要内部蛋白gp IPⅢ聚集而成,这个过程发生于或近于宿主细胞膜上并且需要gp31、gp40、gp20和gp21以及宿主大肠杆菌基因产物的参与,在DNA装填之前,前头部上再加入gp24噬菌体缜部至少出5种T4蛋白,即gp13、gpN2、gpN4、gpN14和gpN6组成。

  2、DNA装填

  当T4头部外壳装配完成后,T4-DNA就随之装填到头壳中,由于DNA长度为500nm,而T4头部的长度不0.1nm,因此DNA在头壳腔内是紧密折叠的,至于DNA是如何装进头壳的还不十分清楚。通常T4DNA的装填需要gp4、gp16和gp17的参与,基因49的ts突变体在较高温度下形成空头,温度降低时则产生正常充满DNA的头部。现在已经证实gp19具有核酸酶的活性,能够对复制屮的DNA多联体产生切割。值得指出的是每次DNA装填的长度要比正常T4-DNA基因组多出20%,这可能就是产生末端冗余的机制。

  3、尾管和管鞘装配

  尾管由T44个拷贝的gp19构成,其中每6个gp19分子组成一个环,这样就可产生由24环叠成的螺腚管。随后z装配成的尾管与基板连接,再在gp54引物的参与下,gp18围绕尾管聚合形成尾鞘。与gp19一样,gp18也是由T4个拷贝组成24个重叠环。最后在尾管的近末端加上即gp3和gp15,其中gp15可以稳定装配的尾鞘,并组成颈与颈圈附着的连接部。

  T4噬菌体尾部和头部分别装配完成后,头和尾就可自发地产生结合,这种结合作用在体外和体内均可以发生,而且不需要额外基因产物的加入。

  4、基板装配

  基板是通过两个独立的装配程序形成的,由7个基因广物gp10、gp11、gp7、gp8、gp6、gp53和gp25相互作用形成的楔状物,以装配形成外部呈六角形结构的6个“臀”,另外由6个基因产物gp27、gp5、gp26、gp28、gp51和gp29相互作用,产生一个中心的“塞子”,再由一个塞子和6个臂结合而成一个不稳定的六角形前体结构,并且在另外4个基因产物gp9、gp12、gp48和gp54的参与下构成完整的基板。

  5、尾丝装配

  T4尾丝装配和附着于基板的6个顶角需要8个T4基因产物参与,其中gp37、gp36、gp35和gp34为尾丝的结构组分,gp38、gp57、gp63和 gpWac起附属和催化作用,一个完整的尾丝可能含有gp34、gp36、gp37各两个分子和一个分子的gp35,尾丝由远侧半段和近侧半段组成,gp37、gp36、gp35构成尾丝的远侧半段,gp34组成近侧半段,见g38和gp57为两个装配附属蛋白,它们是g37聚合所必需的;gp63和gpWac则是尾丝附着于基板所必需的。g63不出现在除菌体颗粒中,但它能使近侧半段尾丝的近端顶部与基板相互作用,gpWac还是噬菌体的颈须蛋白,由它组成的6根丝状物,即颈须附着项圈。尾丝装配与噬菌体颗粒其余部分无关,尾丝必需在头与尾连接之后才能附着于基板上。

推荐
关闭