由戊二醛将碱性磷酸酶与抗体的结合实验
实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 实验所需「试剂」具体见「其他」 透析 25 mg 碱性磷酸酶和 10 mg lgG,分别在 PBS 中 4℃ 过夜,中途换液。在透析后的蛋白质溶液中加入戊二醛,最终浓度达到 2%(体积分数),4℃ 缓慢搅拌 2 h。用 PBS 透析 6 h,最后用 0.5 mol/L Tris-HCl pH 8.0 透析,4℃ 过夜。储存时在溶液中加入 1% BSA。 |
注意事项 | |
其他 | 试剂: 戊二醛(Mr=100.1;50% 水溶液,商品化) 碱性磷酸酶(来自牛小肠黏膜,10 mg/ml) 0.5 mol/L Tris-HCl,pH 8.0 IgG 溶液(10 mg/ml 溶于缓冲液中,PBS 或 0.5 mol/L Tris-HCl,pH 8.0)PBS(磷酸缓冲液:10 m mol/L pH 7.2 磷酸二氢钾-钠,0.8% NaCl,0.02% KCl) 牛血清蛋白 透析管(Visking) 展开 |
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