关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

脐带和脐血来源干细胞的培养实验_酶消化法

2019.4.04
实验材料

脐带

试剂、试剂盒

Wharton胶PBSA胶原酶

仪器、耗材

培养瓶

实验步骤


(a)脐带取材后,可在PBSA中保存1〜24h。


(b)除去血管,将Wharton胶剪成大约0.5cm的小组织块。


(c)将剪碎的组织块转移到50mL离心管,用无血清DMEM洗,室温250g离心5min。


(d)倒掉上清液,将离心后的沉淀物拍散,浸泡在0.1%胶原酶(大约是沉淀物体积的3倍)中,37℃消化16〜18h。


(e)加人适当体积的PBSA(消化液体积的2倍),室温250g离心5min。


(f)倒掉上清液,加2.5%胰蛋白酶(大约是沉淀物体积的2倍)37℃处理30min,轻轻搅动。


(g)加人适当体积的FBS(消化酶体积的10%)中止胰蛋白酶作用。


(h)用培养基洗。


(i)用培养基重悬分离得到的细胞,按大约1×103细胞/cm密度将细胞接种到培养瓶中。

展开


推荐
热点排行
一周推荐
关闭