HPLC的应用以及方法开发（1）
据2004年数据统计，世界上化合物总数多达4700多万种;
在全部有机化合物中仅有20%左右的样品适用于GC分析;
而HPLC可对80%左右的有机化合物进行分离和分析;
HPLC特别适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物以及生物活性物质的分离和分析并且可以做制备;
在医药、食品、农业、生命科学、化工、环保等领域都有着广泛的应用潜力;
HPLC的应用领域
1.在食品研究中的分析应用
食品中的天然成分
碳水化合物;
类脂化合物、甘油三酸酯、胆固醇;
脂肪酸和有机酸;
蛋白、肽、氨基酸;
食品添加剂
酸味剂、甜味剂、香精、乳化剂;
抗氧化剂、防腐剂;
颜料和染料(色素);
维生素;
污染物
霉菌(黄曲霉毒素);
农药残留和兽药残留;
多环芳烃(PAHS)和亚硝酸;
2.在医药研究中分析应用
※药物分析有USP、BP、CP等标准：
常用药物研究中的应用：解热镇痛药、镇静药、安定药、心血管药、磺胺类消炎药等。
甾体药物研究中的应用：肾上腺皮质激素、雄性激素、雌性激素和孕激素等。
抗菌素类药物研究中的应用：青霉素、头孢菌素、庆大毒素、四环素、氯霉素、诺氟沙星等。
中草药研究中的应用：生物碱、甙类(皂甙、强心甙、黄酮甙等)、萜类;
手性药物研究中的应用：光学异构体的拆分(如，解毒剂D-青霉胺毒性小，L-异构体毒性很强)、医疗药物的检测、新药研究、药物代谢、药代动力学研究。
在生物化学和生物工程中的应用：氨基酸、多肽合成和蛋白质的分析研究;核碱、核苷、核苷酸和核酸的分析研究;生物胺的分析研究(儿茶酚胺类);
在精细化工分析中的应用：醇、醛和酮、醚的分离分析;酸和酯的分离分析;表面活性剂的分析;聚合物的分析研究;药物、农药、染料、炸药等工业产品;
化妆品行业要控制和分析：防腐剂、防晒剂、性激素以及维生素等;
在公安、刑警破案工作需要：投毒药物、毒品分析等;
在环境污染分析中的应用：废气、废水、废渣中多环芳烃、多氯联苯、农药残留、酚类和胺类的检测;
在无机离子分析中应用：饮用水、酸雨、土壤中阴离子和阳离子分析;
方法开发的过程
1.想办法得到各种信息
向同行了解是否做过此类样品或是否有类似样品的分析方法;
查文献和方法，如，CA，AA，AOAC，EP;
仪器制造商的文献，如，Dionex，Waters;
2.对色谱柱有足够的了解
掌握分离机理，自己开发方法;
充分了解您自己的样品;
分析时要了解哪方面的情况?
灵敏度的要求有多高?
样品的本底是否很复杂?
有多少组份要分析?
对分析的精确度、准确度等有多高要求?
是否因是日常检验，而要求方法容易使用?
3.分离(制备)时要了解哪方面的情况?
要分离(即，制备)的样品量有多大?
要分离的组份在样品中的含量很高?还是微量?
是否需要保持生物活性?
对分离产物纯度的要求有多高?
纯度或活性的鉴定如何完成?
4.使用文献方法注意点。。。
5.色谱柱填料的种类、品牌是否相同?
6.注意文献方法的流动相;
7.注意色谱柱的规格：内径、柱长;
需要调整流速与进样量;
8.注意梯度条件;
