elisa实验的试剂器材
试剂:
包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):
NaHCO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸馏水至1000ml
2.洗涤缓冲液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸馏水至1000ml
3.稀释液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗涤缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5~10%使用。
4.终止液(2M H2SO4):
蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。
5.底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml
0.1M 柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸馏水50ml。
6.TMB(四甲基联苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml无水乙醇) 0.5ml
底物缓冲液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2 32μl
7.ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物缓冲液(PH5.5) 1ml
3%H2O2 2μl
8.抗原、抗体和酶标记抗体。
9.正常人血清和阳性对照血清。
器材:
1.聚苯乙烯塑料板(简称酶标板)40孔或96孔,ELISA检测仪,50μl及100μl加样器,塑料滴头,小毛巾,洗涤瓶。
2.小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。
3.4℃冰箱,37℃孵育箱。