提升CELLLection™释放步骤效率的通用技巧

·请确保RPMI+1% FBS的pH值不要太高：DNA酶I在pH 7.0–7.4之间的效率最高（RPMI暴露于大气环境中会导致pH值增加，pH指示剂会变紫）。

·请勿在DNA酶I的处理过程中使用RPMI+10% FCS。应用10%的FBS会比1%的FBS获得的细胞得率更低（可能由于一些批次的FBS中含有的DNA酶I抑制因子）。

·请确保缓冲液中含有DNA酶活性所需的Mg2+/Ca2+。

·DNA酶I必须温和处理。剧烈搅拌DNA酶溶液会降低酶活性。一定不要对DNA酶溶液进行涡旋操作。

·当回收较低数量的细胞时，我们推荐您使用RPMI+1% FBS培养基预先包被管体，以减少细胞的损失（细胞很粘，容易在分选过程中贴附于管壁上）。

·DNA酶I在20°C条件下具有良好活性，不过，我们推荐用户在DNA酶I的处理步骤之前将RPMI+1% FBS预热至37°C，因为不同实验室的室温并不相同。

·当细胞与DNA酶释放缓冲液孵育后，在使用磁力架分离之前对磁珠-细胞混合物进行彻底的吹打非常重要，这样可提供机械力打断DNA连接。未仔细吹打细胞将会降低细胞的得率。