分析步骤

　　1、测定

　　1.1 用吸管取10.00ml试样（氮含量超过100μg时可减少取样量并加入纯水至10ml）于干比色管中。

　　1.2 试样不含悬浮物时，按下列步骤进行。

　　a 加入5ml碱性过硫酸钾溶液（3.3），上塞并用纱布和线包扎紧，以防弹出。

　　b 将盛有试样的比色管置于医用高压蒸汽灭菌器中，加热，使压力表指针到1.1—1.4kg/cm2,此时温度达120—140℃后开始计时，或将比色管置于家用高压锅中，加热至顶压阀吹气时计时，保持半个小时。

　　c 冷却至室温，取出比色管。

　　d 加盐酸（3.4）1ml，用纯水稀释至标线，混匀。

　　e 移取部分溶液至石英比色管中，在紫外分光光度计上，以纯水作参比，分别在波长为220和275nm处测定吸收度，并用（1）式计算出校正吸收度A。

　　试样含悬浮物时，先按上述6.1.2中a至d步骤进行。然后待澄清后，移取上述清液同6.1.2.e步骤测定。

　　空白试验

　　空白试验除以10ml纯水代替样品外，采用与6.1.2完全一致的步骤进行。空白试验的A值不超过0.03。

　　校准

　　1 工作曲线校准系列的配制

　　a 用分度吸管向一组比色管分别加入硝酸盐标准溶液（3.6）0.0、0.50、 1.00、 2.50、5.00、7.50、10.00ml，加纯水稀释至10.00ml。

　　b 按6.1.2a至e步骤进行测定。

　　工作曲线的制作

　　标准溶液及空白溶液在220nm和275nm处测得的吸收值按下列公式计算

　　AS=AS220-2AS275 （2）

　　Ab=Ab220-2Ab275 （3）

　　式中：AS220——标准溶液在220nm波长的吸收光度。

　　AS275——标准溶液在275nm波长的吸收光度。

　　Ab220——空白（零浓度）溶液在220nm波长的吸收光度。

　　Ab275——空白（零浓度）溶液在275nm波长的吸收光度

　　校正吸光度Ar

　　Ar=AS—Ab （4）

　　按Ar值与相应的NO3-N含量（μg）用电脑或用具统计功能的计数器进行线性回归统计计算获取工作曲线1。